Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶

Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶

参考价: 订货量:
155 1

具体成交价以合同协议为准
2023-02-23 13:45:32
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属性:
供货周期:现货;规格:1000U;货号:10101ES80;应用领域:医疗卫生,化工,生物产业;
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产品属性
供货周期
现货
规格
1000U
货号
10101ES80
应用领域
医疗卫生,化工,生物产业
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品简介

Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶,分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3′-dA,可直接用于TA克隆。

详细介绍

产品信息

产品名称        

产品编号

规格

价格(元)

Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶

10101ES80

1000 U

155.00

10101ES90

5×1000 U

735.00


产品描述

Hieff Taq DNA Polymerase DNA聚合酶是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶,分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性,无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3′-dA,可直接用于TA克隆。


产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10101ES80(1000 U)

10101ES90(5×1000 U)

10101-A

10×Taq Buffer (Mg2+ Free)

4×1 mL

20×1 mL

10101-B

25 mM MgCl2

2×1 mL

10×1 mL

10101-C

Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

200 μL

5×200 μL


产品应用

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR


活性定义

用活性化的大马哈鱼精DNA作为模板/引物,74℃30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。


质量控制

核酸外切酶残留检测:10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ,37下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。

切口酶残留检测:10 U本品和0.5 μg IL23R质粒,37下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测:10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA,37下孵育1 h,RNA的电泳谱带无变化。


运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期2年。


注意事项

1)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!


PCR反应体系(冰上配制)

组分

体积(μL)                  

终浓度

ddH2O

to 50  

-

10×Taq Buffer(Mg2+ Free)

5

25 mM MgCl2

3

1.5 mM

dNTP   Mix (10 mM each)

1 μL

0.2 mM

模板DNA

optional

-

引物1(10 μM)

2 μL

0.4 μM

引物2(10 μM)

2 μL

0.4 μM

Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.4 μL

0.04 U/μL



1
Mg2+ 终浓度Mg2+最佳浓度为1.5-2 mM,如有需要,可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg2+最佳使用浓度。      
2
)聚合酶添加:室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性,为了防止非特异性扩增,建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
3)聚合酶浓度:推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间
进行优化。  
4
)不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系):

模板种类

扩增片段

基因组DNA

50 ng~100 ng

质粒DNA

10 pg~20 ng

cDNA

1~5 μL(不超过反应体系的1/10)


PCR
扩增程序

循环步骤

温度(ºC)

时间

循环数

预变性

94

30 sec-5 min

1

变性

94

30 sec

35

退火

50-60

30 sec

延伸

72

60 sec/kb

终延伸

72

10 min

1


【注】:
1)预变性温度和时间:推荐使用94℃。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
2)退火温度和时间:推荐使用60℃,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。

3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。


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货号

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