13113ES60Hifair V NCP Multiplex One Step RTqPCR Probe Kit
Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
Protein A/G Agarose Beads 蛋白A/G琼脂糖珠
面议Bovine Serum Albumin(BSA), DNase, Protease, IgG Fr
面议Timentin(特美//汀)
面议Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red 胰酶-EDTA溶液(0.25%),
面议Peroxidase-Conjugated Goat Anti-Mouse IgM , µ
面议Bovine Serum Albumin(BSA), Fatty Acid Free 牛
面议GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF 谷胱甘肽高速纯化树脂
面议琼脂糖树脂(GST标签蛋白纯化)
¥698His标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂
面议独脚金内酯
¥593GAPDH (Clone:1A6), Mouse mAb 小鼠抗GAPDH 单克隆抗体
面议Calcein-AM/PI Double Stain Kit
面议Hifair® V NCP Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Hifair® V NCP Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 13113ES60 | 100 T | 2782.00 |
Hifair® V NCP Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 13113ES80 | 1000 T | 21832.00 |
Hifair® V NCP Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit | 13113ES92 | 10000 T | 168882.00 |
产品描述
Hifair® V NCP Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第—链cDNA,并利用热启动Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer,Enzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 13113ES50 (50 T) | 13113ES70 (200 T) | 13113ES80(1000 T) |
13113-A | 2×Hifair® V NCP MP Buffera,b | 600 μL | 1.2 mL×2 | 6 mL ×2 |
13113-B | Hifair® V NCP Enzyme Mix c | 50 μL | 200 μL | 1 mL |
13113-C | RNase Free H2O | 600 μL | 1.2 mL×2 | 6 mL ×2 |
【注】a) 2×Hifair® V NCP MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。
b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。
c) Hifair® V NCP Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、热启动Taq DNA Polymerase。
适用机型
ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.
运输与保存方式
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作
反应体系
组分 | 体积(μL) | 体积(μL) | 终浓度 |
2×Hifair® V NCP MP Buffer | 12 | 15 | 1× |
Hifair® V NCP Enzyme Mix | 1 | 1.5 | - |
Primer/Probe Mix (10 μM) | 1-4 | 1-4 | 0.4 μM |
模板RNA | 1-5 | 1-10 | - |
RNase Free H2O | To 25 | To 30 | - |
【注】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整。
b) 探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
c) 模板稀释:qPCR灵敏度*,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。
d) 反应体系:推荐使用25 μL、30 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
e) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
| 反应阶段 | 温度 | 时间 | 循环数 |
1 | 逆转录 | 50℃a | 10 min | 1 |
2 | 预变性 | 95℃ | 10 min | 1 |
3 | 扩增反应 | 95℃ | 15 sec | 45 |
60℃b | 30 secc |
【注】
a) 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min。
b) 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。CDC*推荐的ORF1ab和N引物,退火温度建议≥60℃。
c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据短时间限制进行设置。
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dUTP, 100mM Solution 脱氧尿苷三磷酸溶液(100 mM) | 10128ES80 | 1mL | 853.00 |
HB200211