产品信息

产品描述

本品是在大肠杆菌 BL21（DE3）菌株基础上制备的化学转化感受态细胞，是以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的高效蛋白表达宿主。可同时表达T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶，用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等质粒的蛋白表达。适合于非病毒蛋白重组表达。使用pUC19检测转化效率达10⁷ cfu/μg DNA 以上。

BL21 (DE3)感受态细胞基因型：F^-ompT hsdS_B (r_B^-m_B^-) gal dcm (DE3)。

产品组分

运输与保存方法

干冰运输；-80℃保存，有效期6个月。请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

注意事项

1） 本产品应保存在-80℃，不可反复冻融，以免降低感受态细胞的转化效率。

2）本产品在冰中解冻时间不宜过长，感受态细胞刚化冻时转化效率高。

3） 混入质粒时应轻柔操作。

4） 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

5） 本产品仅作科研用途！

使用方法

1. 取100 μL感受态细胞，冰浴、解冻（大约5 min）。

2. 立即向解冻后的感受态细胞悬液中加入目的DNA，轻轻弹匀，冰浴静置25 min。

【注】：所加DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。

3. 42℃水浴中热激45 sec，然后快速将EP管转移到冰上，静置2 min。

【注】：此过程不要晃动，否则会降低转化效率。

4. 向离心管中加入700 μL左右不含抗生素的LB或2YT培养基，混匀后37℃，200 rpm复苏60 min。

5. 5000 rpm离心1 min收集菌体，留取100 μL左右上清涂布至含有相应抗生素的培养板上，37℃培养过夜。

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