Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品简介
N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆,主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。翌圣酵母重组表达N-糖苷酶 F(比活性:750000 U/mL),可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品带his标签,常应用于抗体及其相关蛋白去糖基化。
另外,我司还提供其他类型的糖苷酶,包括酵母重组表达的N-糖苷酶 F(Cat#20407ES,比活性:100000 U/mL),糖苷内切酶H(Cat#20414ES),糖苷内切酶S(Cat#20413ES)。
产品信息
编号 | 组分名称 | 20415ES01 | 20415ES02 |
20415-A | PNGase F | 15 KU | 75 KU |
20415-B1 | Buffer 1(10×) | 150 μL | 750 μL |
20415-B2 | Buffer 2(10×) | 300 μL | 1500 μL |
20415-B3 | 10% NP-40 | 300 μL | 1500 μL |
产品性质
中文别名(Chinese synonym) | N-糖酰胺酶F;N-糖苷酶 F |
英文别名(English synonym) | PNGase F |
来源(Source) | 酵母重组表达 |
分子量(Molecular weight) | 36 kDa |
比活性(Specific activity) | 750000 U/mL |
缓冲液组分(Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50% Glycerol |
酶活定义(Unit Definition) | 1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。 |
储存条件
-15~-25℃保存,有效期1年。
使用说明
变性条件下蛋白质去糖基化
1)在水中加入1 μL Buffer 1和目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL;
2)100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却,离心10秒;
3)加入2 μL的Buffer 2、2 μL的10%NP-40、6 μL去离子水,总反应体积20 μL;
4)加入0.2~0.5 μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3 h。
非变性条件下蛋白质去糖基化
1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目标糖蛋白(1-20 μg)至最终体积为 20 μL。
2)加入 0.5~1 μL 的PNGase F, 轻轻混匀。
3)37°C 孵育 4-24 h。
注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F的量和延长孵育时间。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。