Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase来源于Thermophilic Geobacillus sp DNA Polymerase I，经基因工程改造去除了其5’-3’核酸外切酶活性。本产品具有强5’-3’ DNA聚合酶活性、链置换活性及dUTP耐受性，更适合于防污染的等温扩增反应，如LAMP、CPA等。
产品组分
编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
14402ES92 (8,000 U) | 14402ES97 (40,000 U) | ||
14402-A | Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) | 200 μL | 1 mL |
14402-B | 10× Hieff® Bst Plus DNA Polymerase Buffer | 1 mL | 3 × 1 mL |
14402-C | 100 mM MgSO4 | 1 mL | 3 × 1 mL |
产品应用
本产品适用于LAMP、CPA、RCA等多种等温扩增反应。
单位定义
1 U指65℃条件下反应30 min，能使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需的酶量。
酶保存液成分
10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，0.1 mM EDTA，1 mM DTT，0.1% Triton X-100，50%甘油，pH 7.5 @ 25℃。
热失活
85℃，5 min。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1. 酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存；
2. 本产品仅做科研用途；
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
LAMP实验案例
1、反应体系配制
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
10×Reaction Buffer | 2.5 | 1× |
100 mM MgSO4 | 0.75 | 3 mM+2 mM in buffer=5 mM |
dNTP Mix (25 mM each) | 1.4 | 1.4 mM each |
dUTP (25 mM) 选加 | 1.4 | 1.4 mM |
UDGase (1 U/μL) 选加 | 1 | 0.04 U |
模板DNA | 10 ng~1 μg | - |
10×Primers | 2.5 | - |
Hieff® Bst Plus DNA Polymerase (40 U/μL) | 1* | 1.6 U/μL |
ddH2O | to 25 | - |
【注】：1. *：根据不同实验，Hieff® Bst Plus DNA Polymerase添加量可进行调整优化；
2. 10×Reaction Buffer：200 mM Tris-HCl，500 mM KCl，100 mM (NH4)2S04，20 mM MgS04，1% Tween-20，pH 8.8 @ 25℃。
3. 根据不同的实验，Mg2+浓度可在4–10 mM之间调整。
4. 10× Primers：16 µM FIP/BIP，2 µM F3/B3，4 µM Loop F/B each。
5. 本公司dNTP（Cat#10124），dUTP（Cat#10128）和UDGase（Cat#10303）可以与本品配套使用。
2、反应条件
温度 | 时间 | 作用 |
25~37°C | 5~10 min | 降解含U模板（选做） |
65°C | 30~60 min | 反应 |
85℃ | 5 min | 失活 |
