AN54L017/AN54L018PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range)
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上海市所在地
产品描述
PikoGreen是一种极为灵敏的双链DNA荧光染料,仅与DNA双链结合后才发出荧光,且所产生的荧光与DNA浓度呈正比,在存在ssDNA、RNA和单体核苷酸的条件下,可以选择性地检测低至25 pg/mL的dsDNA。与传统DNA定量方法相比,具有如下优点:
灵敏:数量级较UV吸光读数更敏感,可节省样品。
特异性强:只结合dsDNA,特异性强,不受样品常规污染影响。传统紫外吸光法容易受样品中存在的单链DNA,蛋白,RNA等影响。
耐受性好:耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖,可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。
线性范围宽:PikoGreen dsDNA染料测定DNA浓度,在100 pg/mL~100 ng/mL范围内呈良好线性。
方便操作:在样品中加入染料,染色5~6 min,然后读数即可,且适用于96和384孔板。与大多数基于荧光的酶标仪兼容。
本产品可适用于各种DNA样品分析、PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活性分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 |
PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range) | AN54L017 | 200 assay |
PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range) | AN54L018 | 1000 assay |
产品组分
组分 | AN54L017(200 assay) | AN54L018(1000assay) |
A:1×定量缓冲液 | 50 mL | 250 mL |
B:Piko Green Dye 100 × in DMSO反应液 | 0.5 mL | 2.5 mL |
C:100×反应增强液 | 0.5 mL | 2.5 mL |
D: dsDNA 标准品9 x 0.5 mL(0 , 2, 6.25, 12.5 , 25, 50 , 100, 150 and 200 ng/μL) | 9管(每管0.1 mL) | 9管(每管0.5 mL) |
保存方法
冰袋运输,4℃避光干燥保存,保质期36个月。如果较长时间不用,建议把组分C与组分D放置于-20℃保存。
使用方法
(以96孔板为例)
1.使用前,将产品从储存条件下取出恢复至室温。PikoGreen提供的是DMSO溶液,在4℃存放时成固体,可37℃水浴溶解。每个组分应充分震荡或涡旋混匀、离心,以免造成不必要的试剂损耗。
2.分别吸取19.6 mL组分A, 200 μL组分B, 200 μL组分C配制成20 mL1×PikoGreen工作液。新配工作液应在1 h内使用,工作液存放重新使用时须重悬,以免染料沉淀,工作液存放24 h,会轻微影响定量结果。
3.每个样品,吸取200 μL 的工作液至黑色的96孔板微孔中。为确保结果精确可靠,建议每个测试样品和DNA标样分别做平行的3个复孔。
黑色的检测板可以减少各测试样品间的荧光干扰。
4.96孔板微孔中,分别加入dsDNA标样或待测样品各10 μL,并用移液器轻轻混匀。
5.将微孔板室温避光孵育10分钟,在Ex(nm):350, Em(nm):460处用酶标仪测量荧光值。
6.制作标准曲线,计算样品浓度。
注意事项
1.为了得到最佳结果,请使用精确校准的移液器和去RNA酶的枪头、试管以及检测板。
2. 建议检测时每个DNA标样和未知样品都设定3个复孔。如果检测时不只一块96孔板,建议每块96孔板都设定一条标准曲线,尽量减少检测板之间的误差。
3. 为得到最佳结果,检测板应在一小时内读取完毕。如果将反应液重新储存并在24 h内读取数据,结果的精确性会有轻微损失。