ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022培养
形态特性 淋巴母细胞样
品牌 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:
2传代;5-6天一次
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY1022培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-GST-Tag/Biotin 生物素标记兔抗重组谷胱甘肽转移酶GST标签蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear Anti-gens 3) EB病毒编码核蛋白-3(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
醛糖还原酶抗体 Anti-AKR1B1/ADR 0.1ml
ZNF23 英文名称: 锌指蛋白23抗体 0.1ml
DIS3L 英文名称: 有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4G(ser1108) 磷酸化真核翻译起始因子4G抗体 规格 0.1ml
EBNA-3 (EpsteinBarr nuclear Anti-gens 3) EB病毒编码核蛋白-3(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
UBC(Human urinary bladder cancer antigen) ELISA Kit 人膀胱癌抗原Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-HDAC12 组蛋白去乙酰化酶12抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Megsin 丝氨酸蛋白酶抑制剂B7抗体 规格 0.2ml
DBH(Human dopamine- Beta-hydroxylase) ELISA Kit 人多巴胺-β羟化酶 96T
RDH11 英文名称: 视黄醇脱氢酶11/丙型肝炎病毒核心蛋白抗体 0.2ml
C1orf189 英文名称: 1号染色体开放阅读框189抗体 0.2ml
Anti-HDAC12 组蛋白去乙酰化酶12抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
人胞浆非特异性二肽酶(Cytosolic non-specific dipeptidase) ELISA试剂盒人96T0.78-50 ng/mL小鼠β防御素2(β-BD-2)ELISA试剂盒,英文名:β-BD-2 ELISA Kit人细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒,英文名:CTX-Ⅰ ELISA Kit人双重特异性蛋白磷酸酶1(DUSP1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠周期素依赖性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA试剂盒,英文名:CDKN1A ELISA Kit人真核翻译起始因子3a(eIF3a)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)ELISA试剂盒,英文名:SOCS3 ELISA Kit人IgE-Fc片段受体Ⅱ(FcεRⅡ)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠溶质载体家族30成员7(SLC30A7)ELISA试剂盒,英文名:SLC30A7 ELISA Kit人的谷胱甘肽S转移酶ω1(GSTO1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠巨噬细胞来源趋化因子(MDC)ELISA试剂盒,英文名:MDC ELISA Kit人组蛋白H2B型2-E(Histone H2B type 2-E)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠肝素酶(HPA)ELISA试剂盒,英文名:HPA ELISA Kit
人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒人96T4.69-300 pmol/L小鼠嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)ELISA试剂盒,英文名:Eotaxin ELISA Kit人白介素1受体关联激酶3(IRAK-3)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA试剂盒,英文名:SOD3 ELISA Kit人白介素17受体B(IL17RB)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠IL2诱导T细胞激酶(ITK)ELISA试剂盒,英文名:ITK ELISA Kit脂氧素A4(Lipoxin A4)ELISA试剂盒通用96T31.2-2000 pg/mL大鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒,英文名:NAP-2/CXCL7 ELISA Kit人瘦素(LEP)ELISA试剂盒人96T3.12-200 ng/mL大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACE)ELISA试剂盒,英文名:ACE ELISA Kit人甘露糖结合蛋白C(MBP-C)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠肾上腺素(EPI)ELISA试剂盒,英文名:EPI ELISA Kit人神经秩蛋白(Neurturin)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒,英文名:pERK ELISA Kit
品名 规格 备注
Vitamin A 英文名称: 维生素A抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr204) 磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体 规格 0.1ml
lamin A 核纤层蛋白A抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
phospho-DAXX (Ser213) 英文名称: 磷酸化Fas相关死亡结构域蛋白抗体 0.1ml
Anti-phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Anti-H1N1/FITC 荧光素标记抗流感病毒A抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-RACK1/FITC 荧光素标记受体激活蛋白激酶C1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh BCHE (CT) 丁酰胆碱酯酶抗体(C端) 规格 0.1ml
AATK peptide 细胞凋亡关联酪酸激酶抗原 0.5mg
GGT1 英文名称: γ谷酰转移酶抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM/Cy5.5 Cy5.5标记的兔抗大鼠IgM 规格 0.1ml
Anti-RACK1/FITC 荧光素标记受体激活蛋白激酶C1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml