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人前列腺癌细胞;LNCaP价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人前列腺癌细胞;LNCaP价格
形态特性 上皮样;梭形
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞由Horoszewicz JS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。5-α-双氢睾酮可影响该细胞的生长和酸性磷酸酶的产生。该细胞不形成均一的单层而是成簇生长,所以传代的时候要反复吹打形成单个细胞;该细胞贴壁不牢,达不到汇合状态,而且会使培养基迅速变酸;传代后48h内一定要保持培养瓶静止.如果此时挪动培养瓶,会使大部分细胞从瓶底脱落。如果出现此种情况,需要重新孵育24~48h使细胞重新贴壁,细胞贴壁后可更换培养基。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3~1:6传代;5~7天1次。
传代情况 P50
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
同工酶
染色体 72~88,XY
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti-factor VIII/PE 荧光素PE标记第八因子相关抗原抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Egr-1(Early growth response 1) 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
血管紧张素I抗体 Anti-Ang I/AT1 0.1ml
ZBTB2 英文名称: 锌指蛋白437抗体 0.2ml
DNER 英文名称: 脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4E(Ser209) 磷酸化真核翻译起始因子4E抗体 规格 0.1ml
Egr-1(Early growth response 1) 早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCSK9/NARC1 神经细胞凋亡调节转化蛋白1抗体(前蛋白转化酶枯草溶菌素9) 规格 0.1ml
C Kit Human 人 C / SLAMF2 / BCM1 ELISA配对抗体 ELISA
TCF12 英文名称: 转录因子12抗体 0.2ml
CD146 英文名称: 黑色素瘤细胞粘附分子CD146抗体 0.1ml
Anti-Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
人β-防御素129(β-DF129)ELISA试剂盒人96T7.8-500 pg/mL小鼠载脂蛋白A4(APOA4)ELISA试剂盒,英文名:APOA4 ELISA Kit人卵固蛋白同族物1(Ovostatin homolog 1)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠活化素B(ACV-B)ELISA试剂盒,英文名:ACV-B ELISA Kit人前胶原C内肽酶增强子1(PCPE1)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)ELISA试剂盒,英文名:LDL-C ELISA KiISA Kit for Phylloquinone大鼠成纤维生长因子受体底物2(FRS2)ELISA试剂盒,英文名:FRS2 ELISA Kit大鼠α-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)ELISA试剂盒,英文名:αHSP ELISA Kit大鼠90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)ELISA试剂盒,英文名:HSP90αA1 ELISA Kit豚鼠干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒,英文名:IFNα ELISA Kit
人电子传递黄素蛋白脱氢酶(ETFDH)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL小鼠脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)ELISA试剂盒,英文名:DNASE1 ELISA Kit人腺苷高半胱(AdoHcyase)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)ELISA试剂盒,英文名:apo-B48 ELISA KiISA Kit for Human Interferon-inducible protein AIM2小鼠血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)ELISA试剂盒,英文名:AT2R ELISA Kit人胎盘碱性磷酸酶(ALPP)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠瘦素(Leptin)ELISA试剂盒,英文名:Leptin ELISA KiISA Kit for Human Angiopoietin-1小鼠内脂素/内脏脂肪素(visfatin)ELISA试剂盒,英文名:visfatin ELISA Kit人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒,英文名:TRAb ELISA KiISA Kit for Human Coiled-coil domain-containing protein 82小鼠胱天蛋白酶10(CASP-10)ELISA试剂盒,英文名:CASP-10 ELISA Kit
品名 规格 备注
VAMP2 英文名称: 囊泡相关膜蛋白2抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-B-Raf (Ser602) 磷酸化B-Raf抗体 规格 0.1ml
HCMV UL49(Human Cytomegalovirus UL49 Gene) 人巨细胞病毒UL49抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DOCK7 英文名称: 胞质分裂专一蛋白7抗体 0.2ml
Anti-AMPK beta 1 腺苷单磷酸活化蛋白激酶β1抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
BK(Human Bradykinin) ELISA Kit 人血管舒缓激肽Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖体S6蛋白激酶β2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HRP2 肝癌衍生生长因子2抗体 规格 0.2ml
ABM-Ab(Human alveoli basement membrane zone antibody) ELISA Kit 人抗肺泡基底膜抗体 96T
PDGFAA + PDGFBB 英文名称: 血小板源性生长因子AA+BB抗体 0.1ml
Connexin-29 英文名称: 间隙连接蛋白29抗体 0.1ml
Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2 核糖体S6蛋白激酶β2抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml