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人乳腺癌细胞;MDA-MB-453价格悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
细胞名称 人乳腺癌细胞;MDA-MB-453价格
形态特性 上皮样;多角形
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞系由Cailleau R在1976年从一名48岁的患有转移性乳腺癌的白人女性的心包渗出液中分离建立的。该细胞表达FGF的受体。
培养条件 L15:
Leibovitz Medium 10%FBS
传代方法 1:2~1:6传代;每周2~3次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:12;D16S539:9;D18S51:15,20;D19S433:13,14;D21S11:29,31;D2S1338:23,24;D3S1358:15,OL;D5S818:11;D7S820:10;D8S1179:10,12;FGA:18,23;TH01:6;TPOX:10;vWA:17,18;
同工酶
染色体 72~90
使用权限 A类
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
Anti- Beta-HCG/Gold 胶体金离子标记小鼠抗人β亚基人绒毛膜促性腺激素单抗IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
芳香化酶抗体 Anti-Aromatase 0.1ml
ZNF473 英文名称: 锌指蛋白473抗体 0.2ml
DNA Ligase IV 英文名称: DNA连接酶4抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 磷酸化4E结合蛋白1,2,3抗体 规格 0.1ml
ECP(eosinophil cationic protein)mouse rat 嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
TXB2(Human Thromboxane B2) ELISA Kit 人血栓素B2Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-lamin C 核纤层蛋白C抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch样蛋白14抗体 规格 0.2ml
Inhbb(Human inhibin beta-B) ELISA Kit 人抑制素β-B 96T
Protein S 英文名称: 蛋白S抗体 0.2ml
CDCA7L 英文名称: 细胞分裂周期相关蛋白JPO2抗体 0.2ml
Anti-lamin C 核纤层蛋白C抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA试剂盒,英文名:ABCG2 ELISA KiISA Kit for Human C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒,英文名:PAL ELISA Kit人钙调素(RC)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠激活素A(Activin A)ELISA试剂盒,英文名:Activin A ELISA KiISA Kit for Human Sulfotransferase 1A1大鼠乙酰辅酶A羧化酶α(ACACα)ELISA试剂盒,英文名:ACACα ELISA Kit人生长抑素受体2(SSTR2)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠硒蛋白P1(SEPP1)ELISA试剂盒,英文名:SEPP1 ELISA KiISA Kit for Human Gamma-synuclein大鼠神经疾病靶标酯酶(NTE)ELISA试剂盒,英文名:NTE ELISA Kit人S100钙结合蛋白A16ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)ELISA试剂盒,英文名:PCK1 ELISA Kit
人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)ELISA试剂盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)ELISA试剂盒,英文名:f-βCG ELISA KiISA Kit for Human Transcription termination factor 2大鼠饥饿素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)ELISA试剂盒,英文名:GHRL ELISA KiISA试剂盒人TM4SF20蛋白人96T0.312-20 ng/mL大鼠芳香烃受体核转位因子样蛋白(ARNTL)ELISA试剂盒,英文名:ARNTL ELISA KiISA Kit for Human Von Hippel-Lindau disease tumor suppressor大鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒,英文名:C4 ELISA Kit大鼠VEGF共调节趋化因子1(VCC1)ELISA试剂盒,英文名:VCC1 ELISA Kit大鼠10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)ELISA试剂盒,英文名:IP10 ELISA Kit豚鼠C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒,英文名:CRP ELISA Kit
品名 规格 备注
VE Cadherin 英文名称: 上皮型钙粘附分子抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-cdc2 (Ser39) 磷酸化周期素依赖激酶2抗体 规格 0.1ml
IRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干扰素调节因子抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DREF 英文名称: DNA复制相关元件结合因子抗体 0.2ml
Anti-ADNP/NAP 活性依赖的神经保护肽抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-Egr-1/FITC 荧光素标记早期反应基因-1/应急反应生长基因1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Anti-MMP-1/FITC 荧光素标记基质金属蛋白酶-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh C2orf44 2号染色体开放阅读框44抗体 规格 0.2ml
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒细胞趋化蛋白22抗原 0.2mg
H2BFM 英文名称: H2B组蛋白家族M蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh SAMD15/C14orf174 14号染色体开放阅读框174 规格 0.2ml
Anti-MMP-1/FITC 荧光素标记基质金属蛋白酶-1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml