ATCC 品牌
经销商厂商性质
上海市所在地
细胞名称 人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1培养
形态特性 上皮样
品牌 贴壁生长
特征特性 该细胞是从一名12岁的白人女性卵巢畸胎瘤患者的腹腔积液中分离建立的;该细胞可以形成紧密的编织状的克隆,在低血清培养、低密度接种或用5-bromo-2'-deoxyuridine处理时可以分化为胚状体。该细胞表达胚胎抗原PCC4,但未检测到F9的表达。
培养条件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:4~1:10传代;每周2~3次。
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,12;D13S317:9,10;D16S539:9,12;D18S51:15,18;D19S433:13;D21S11:29,31.2;D2S1338:24;D3S1358:15;D5S818:11;D7S820:9;D8S1179:14,15;FGA:24;TH01:7,9;TPOX:11;vWA:15,17;
同工酶
染色体 40~46,XX
使用权限 A类
人卵巢畸胎瘤细胞;PA-1培养操作流程:
1.1 主要试剂与仪器:倒置相差显微镜(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存:
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液(37℃预热,8~10倍体积)离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内,在37℃、5%co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek-293细胞48h换液1次,细胞长至60%~70%融合时,用0.25%胰酶消化1~2min,将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散,为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次,获得细胞悬液,然后加入倍量的培养基,温和混匀,吸管分装混合液,传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞,待细胞变圆、脱壁并浮起,加入少量培养基离心,再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液,用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数,按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液=(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞,以0.25%胰酶消化成单细胞悬液,计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中,每两小时随机取出3瓶细胞,吸除培养基及未贴壁细胞,加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞,取其平均值,按照公式:贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100%,计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液,以1×104/孔接种于24孔板,每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔,计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d,绘制细胞生长曲线
贴壁细胞: 对于贴壁细胞应先吸(倒)尽培养基,吸的越干净越好,以免中和后加入的消化液,使强度减弱(或PBS洗1-3次)。50ml培养瓶加入消化液约1-3ml,按此比例进行消化,(根据经验),晃动使消化液铺均匀置37度培养箱约2-5分钟,镜下见细胞收缩变圆或少数脱落后,轻轻振动瓶底使细胞全部脱落,加入2-3ml*培养基后,轻轻吹打,使细胞基本成单个悬浮,然后分置其它无菌培养瓶内,加入*培养基后继续培养或实验。
悬浮细胞: 一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入*培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入*培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入*培养基继续培养。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
Anti-TRF/Gold 金离子标记抗转铁蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.5ml(15nm)
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重组人表皮生长因子Multi-class antibodies规格: 100ug
β-抑制蛋白2抗体 Anti-β-arrestin 2 0.1ml
ZNF93 英文名称: 锌指蛋白93抗体 0.2ml
DNAH9 英文名称: 轴丝动力蛋白重链9抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1(Thr36) 磷酸化4E结合蛋白1抗体 规格 0.1ml
rhEGF(rh-Epidermal growth factor) 重组人表皮生长因子Multi-class antibodies规格: 100ug
TXB2 (Rabbit Thromboxane B2) ELISA Kit 兔血栓素B2Multi-class antibodies规格: 96T
Anti-CYP450/FITC 荧光素标记细胞色素P450单氧化酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DACH1 细胞命运决定因子DACH1抗体 规格 0.2ml
Rabbit IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记兔IgG(细胞流式同型对照) 0.1ml
lysozyme 英文名称: 溶菌酶抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh ZNF693/CASZ1 锌指蛋白693抗体 规格 0.2ml
Anti-CYP450/FITC 荧光素标记细胞色素P450单氧化酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
人ω-3脂肪酸受体1(O3FAR1)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒,英文名:Tn-T ELISA KiISA Kit for Human Apelin-13小鼠胃泌素(Gastrin)ELISA试剂盒,英文名:Gastrin ELISA KiISA Kit for Human Arylsulfatase A小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒,英文名:FⅨ ELISA KiISA Kit for Human Contactin-1小鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISA试剂盒,英文名:PTH ELISA KiISA Kit for Human Calponin-1小鼠胆固醇(CH)ELISA试剂盒,英文名:CH ELISA KiISA Kit for Human Early activation antigen CD69小鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒,英文名:IFN-α ELISA KiISA Kit for Human Caveolin-1小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA试剂盒,英文名:MCP-1/CCL2 ELISA Kit
人丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶PP1-α催化亚基(PP-1A)ELISA试剂盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒,英文名:FⅧAg ELISA KiISA Kit for Human Deoxyuridine 5'-triphosphate nucleotidohydrolase, mitochondrial小鼠抑制素βA(INHβA)ELISA试剂盒,英文名:INHβA ELISA KiISA Kit for Folic acid小鼠天冬酰胺合成酶(ASNS)ELISA试剂盒,英文名:ASNS ELISA KiISA Kit for Human Fibulin-1小鼠凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)ELISA试剂盒,英文名:F13B ELISA KiISA Kit for Human Glutaredoxin-3小鼠肌球蛋白重链1(MYH1)ELISA试剂盒,英文名:MYH1 ELISA KiISA Kit for Human Hemojuvelin小鼠多巴胺受体D1(DRD1)ELISA试剂盒,英文名:DRD1 ELISA Kit人孤啡肽受体(Nociceptin receptor)ELISA试剂盒人96T78-5000 pg/mL大鼠活化素A受体抗体(ACV-RAb)ELISA试剂盒,英文名:ACV-RAb ELISA Kit
品名 规格 备注
VCAM1 英文名称: 血管内皮细胞粘附分子抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Bid(Ser61) 磷酸化BH3结构域凋亡诱导蛋白抗体 规格 0.1ml
MIP-1 Beta (macrophage inflammatory protein 1 Beta) 巨噬细胞炎症因子1β 抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
DUSP22 英文名称: 双特异性磷酸酶22抗体 0.2ml
Anti-beta-Amyloid 1-40(CT) β淀粉样肽 1-40 (C端)抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Ep-CAM/CD362(Human Epithelial Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人上皮细胞粘附分子Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接头蛋白Gab 2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-human IgG/PE PE标记的小鼠抗人IgG 规格 0.1ml
ABCG2(Human ATP-binding cassette transporter G2) ELISA Kit 人腺苷三磷酸结合盒转运体G2 96T
sFRP-4 英文名称: 子宫内膜抗体 0.1ml
Cpt1c 英文名称: 脑型肉碱棕榈酰转移酶1C抗体 0.2ml
Anti-phospho-GAB2 (Tyr452) 磷酸化接头蛋白Gab 2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml