中文名称：MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒

英文名称：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit

产品规格：500次

发货周期：1～3天

产品特点：

1．本试剂盒是单溶液式细胞增殖与细胞毒性检测试剂，主要成分包含MTS和一个电子耦合试剂，溶液的稳定性强，反应的灵敏度高。

2．操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时，无需洗涤或收获细胞，免去溶解步骤。

3．无放射性。不需要配制液闪混合物，也不需要处理废弃物。

4．与MTT相比，使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。

5．操作灵活，与MTT不同，平板读数后可放回温箱继续孵育，使颜色进一步生成。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期半年。

使用效果：

96孔板中加入细胞100μL/孔(约1×104)，37℃，5% CO2细胞培养箱培养24小时，加入适当浓度的受试化合物。培养箱中孵育适当时间，每孔中加入10μL的MTS细胞增殖及毒性检测溶液。37℃孵育1-4小时。490nm波长检测光密度。

注意事项：

1、本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融，否则将会增加空白吸收，从而影响检测结果。最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性，则测定不含细胞，仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入 MTS ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用新鲜培养基洗涤细胞两次，然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定，对于大多数情况孵育 1 小时即可，白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测，MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

HCT116, 人结直肠癌细胞 Human

LncaP, 人前列腺癌细胞 Human

6-10B, 人鼻咽癌细胞系 Human

lovo, 人结肠癌细胞 Human

DU 145, 人前列腺癌细胞 Human

Hep-2, 人喉癌细胞系 Human

MDA-MB-231, 人乳腺癌细胞 Human

HL-60, 人早幼粒白血病细胞 Human

CaEs-17, 人食管癌细胞株 Human

MG-63, 人骨肉瘤细胞 Human

kasumi-1, 人白血病细胞株 Human

RBE, 人肝胆管癌细胞 Human

MiaPaCa-2, 人胰腺癌细胞 Human

KM3, 人多发性骨髓瘤细胞 Human

QGY-7701, 人肝癌细胞 Human

PANC-1, 人胰腺癌细胞 Human

U266B1 [U266], 人多发性骨髓瘤细胞 Human

Hep G2, 人肝癌细胞系 Human

PC-12(高分化)，PC12，大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化) Rattus

ARPC4肌动蛋白相关蛋白2/3亚型4抗体

ARSI芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗体

ART1抑制相关蛋白PHEMX抗体

ARVCF精神分裂症与犰狳重复基因抗体

ALDH1乙醛脱氢酶1型抗体

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser80)磷酸化乙酰羧化酶抗体

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase alpha (Ser1263)磷酸化乙酰化酶抗体

phospho-ABCA1 (Ser2054)磷酸化腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体

phospho-Aconitase 1 (Ser138)磷酸化铁调节蛋白1抗体

phospho-Aconitase 1 (Ser711)磷酸化铁调节蛋白1抗体

phospho-Acetyl Coenzyme A Carboxylase beta (Ser220)磷酸化乙酰酶抗体

Annexin VI膜粘连蛋白6抗体

ANKRD42锚蛋白重复结构域蛋白42抗体

Anillin胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体

MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒Adenovirus 5 E1A binding protein腺病毒5结合蛋白BS69抗体(骨形态发生蛋白受体相关分子1)

APOA1载脂蛋白A1抗体

ATG16L自噬相关蛋白16A抗体

操作规程：

1、在96孔板加入细胞00μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入00微升5000～0000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～0μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×00

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)