Caspase 8 活性检测试剂盒
Caspase 8 活性检测试剂盒
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Caspase 8 活性检测试剂盒

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-04-19 16:20:53
481
属性:
供货周期:现货;规格:20次|100次;货号:FS-X9544;应用领域:化工;主要用途:公司产品仅用于科研;
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供货周期
现货
规格
20次|100次
货号
FS-X9544
应用领域
化工
主要用途
公司产品仅用于科研
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上海抚生实业有限公司

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产品简介

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Caspase 8 活性检测试剂盒

Caspase 8 Activity Assay Kit

20次|100次

1~3天

商品介绍:

本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 8酶活性或纯化的caspase 8酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。

Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 8也称FLICE、MACH或Mch5,有时被写作caspase-8或caspase 8,通常以酶原的形式存在,在细胞凋亡的信号转导过程中被激活。Caspase 8被认为是细胞凋亡信号转导过程中比较上游的一个caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介导的细胞凋亡过程中caspase 8被激活,形成一个由p18和p10组成的二聚体,进一步激活下游的caspase 4,caspase 6,caspase 9和caspase 10。

Caspase 8活性检测试剂盒是基于caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA(acetyl-Ile-Glu-Thr-Aspp-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有强吸收。

试剂盒中提供了caspase 8催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 8酶活性的标准品。

试剂盒组分:

裂解液——————8ml

检测缓冲液——————8ml

Ac-IETD-pNA(2mM)———200μl

pNA(10mM)——————200μl

储存条件:-20℃。
培养操作步骤:

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

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Caspase 8 活性检测试剂盒植物凝胶

其他 冷结树酯;结冷胶;吡喃葡萄糖醛酸与6-脱氧-L-吡喃甘露糖和D-吡喃葡萄糖乙酸酯的聚合物钙钾钠盐

英文名称: Phytagel

其他英文名称: Agar substitute gelling agent;Gellan Gum

产品规格: 植物细胞培养级

包  装: 100克/500克

CAS号:71010-52-1

级别:Plant cell culture tested

Congealing Temperature:27~32℃

Transmittance:≥80 %

性状:粉末,溶于水,溶解度:10mg/ml。植物组织培养基中工作浓度为1.5-2.5 g/L,微生物培养基中工作浓度为10 g/L。植物凝胶需要阳离子(特别是二价阳离子)存在才能使胶凝固。一般植物培养基中的钙离子和镁离子的浓度足以让phytagel凝固。微生物学研究所用的低盐培养基中为了使Phytagel凝固,通常需要另外加入钙盐、镁盐或高浓度的Phytagel

用途:生化研究。胶凝剂。Phytagel是从假单胞菌分泌而来的一种琼脂的替代物,是葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖的混合物,具有无色、透亮和高韧性的特点,是配制植物组织培养基和微生物培养基的主要成分。由于其克服了传统琼脂在植物组织培养中的固有缺陷为植物学研究带来了一场新的革命,已经成为了的植物组培产品。

保存:RT

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 


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