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培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
产品属于:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Caspase 4 Activity Assay Kit | 20次|100次 | 1~3天 |
商品介绍:
本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 4酶活性或纯化的caspase 4酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。 Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 4有时被写作caspase-4或caspase 4,可以和Apaf-1相互作用并参与细胞色素导致的caspase 3激活。Caspase 4也可以和caspase 14相互作用。 本Caspase 4活性检测试剂盒是基于caspase 4可以催化底物Ac-LEVD-pNA(acetyl-Leu-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 4的活性。pNA在405nm附近有强吸收。 试剂盒中提供了caspase 4催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 4酶活性的标准品。 |
试剂盒组分:
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-LEVD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
储存条件:-20℃。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
通道蛋白0(AQP-0)elisa试剂盒英文名称:AQP-0 ELISA Kit早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白APH1抗体包装1g
双氢睾酮(DHT)elisa试剂盒英文名称:DHT ELISA Kit磷酸化蛋白激酶AKT1抗体包装25g
瘦素(Leptin)elisa试剂盒英文名称:Leptin ELISA Kit磷酸化蛋白激酶AKT1抗体包装5g
瘦素(LEP)elisa试剂盒英文名称:LEP ELISA KitASH1L蛋白抗体包装1g
嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)elisa试剂盒英文名称:ECP ELISA Kitα2C-AR肾上腺素能受体抗体包装100g
嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPO)elisa试剂盒英文名称:EPO ELISA Kit中心体蛋白AZI1抗体包装25g
嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)elisa试剂盒英文名称:ECF ELISA Kitα蛋白激酶3抗体(心肌)包装5g
嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 3(Eotaxin 3)elisa试剂盒英文名称:Eotaxin 3 ELISA Kit表皮型脂氧合酶3抗体(鱼鳞病相关蛋白)包装1g
嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)elisa试剂盒英文名称:Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit锚蛋白重复域28抗体包装250mg
嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)elisa试剂盒英文名称:Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit淋巴相关AF4样蛋白抗体包装5g
嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)elisa试剂盒英文名称:CyPA ELISA Kit锚蛋白重复结构域蛋白12抗体包装250g
视黄醇结合蛋白4(RBP-4)elisa试剂盒英文名称:RBP-4 ELISA Kit锚蛋白重复结构域蛋白13A抗体包装500g
视黄醇结合蛋白(RBP)elisa试剂盒英文名称:RBP ELISA Kit锚蛋白重复结构域蛋白9抗体包装1G
生长抑素(SS)elisa试剂盒英文名称:SS ELISA Kit锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A抗体包装250MG
生长激素释放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa试剂盒英文名称:GHRP-Ghrelin ELISA Kit脂肪特定转录因子2抗体包装1g
特异性锚样蛋白1抗体血小板因子4(PF4)Otenabant 是一种有效的,选择性的 cannabinoid receptor CB1 拮抗剂,Ki 值为 0.7 nM,对其选择性是对 CB2 的 10
Caspase 4 活性检测试剂盒植物血球凝集素PHA-M
其他植物血凝素
英文名称:Phytohemagglutinin PHA-M
其他英文名称:Lectin from Phaseolus vulgaris (red kidney bean)
产品规格:BR,60-80%
包装:100毫克
CAS号:9008-97-3
级别:BR
效价:<40 μg per mL agglutination activity
蛋白含量:60~80% biuret
产品描述:Agglutination activity is expressed in μg/mL and is determined from serial dilutions of a 1 mg/mL solution. This activity is the lowest concentration to agglutinate a 2% suspension of human erythrocytes in phosphate buffered saline, pH 6.8, after 1 hr incubation at 25 °C
性状:粉末
用途:生化研究。用于细胞体外培养;用于细胞功能及染色体的研究等。
保存:2~8°C