Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)
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Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)

Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-04-19 16:53:01
624
属性:
供货周期:现货;规格:20T|50T|100T;货号:FS-X9571;应用领域:化工;主要用途:公司产品仅用于科研;
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产品属性
供货周期
现货
规格
20T|50T|100T
货号
FS-X9571
应用领域
化工
主要用途
公司产品仅用于科研
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上海抚生实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

中文名称:Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)

英文名称:Caspase-3 Fluorescence Metric Assay

产品规格:20T|50T|100T

发货周期:1~3天

本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织caspase-3 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3 为关键的执行分子,与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-3 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中,没有活性;但在细胞发生凋亡阶段,它被激活,活化的Caspase-3 由两个大亚基和两个小亚基组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。Caspase-3 荧光检测试剂盒就是将caspase-3 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-3 剪切后,发色基团即游离出来,可通过荧光酶标仪测定其荧光强度(激发波长=485nm,发射波长=535nm)。

注意事项

1. Caspase-3 Substrate 避光保存及使用。

2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-3 活化的机制,这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-3 活性无明显改变,需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。

3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg,以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求,因为Caspase-3 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关,如测定的RFU 值偏低,可以通过适当延长反应的时间,如果值还是不高,可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。
注意事项:

1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。

2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。

3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。

4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。

6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。

7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。

8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。

9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。

11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。

操作规程:

1、在96孔板加入细胞00μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入00微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入00微升5000~0000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~0μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及00%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成× MTT 溶液。

5、每孔加50μL × MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×00

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 0%时的药物浓度(IC90)

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Caspase 3荧光法检测试剂盒(AFC)原色硅胶

英文名称:Silicagel,original color

产品规格:AR

包装:500克

CAS号:63231-67-4

分子式:mSiO2•nH2O

级别:AR

干燥失重:≤5.0%

水吸附量:≥32.0%

性状:玻璃状微带棕色无定形多孔性颗粒或小珠状。为部分水合的二氧化硅。有吸湿性。耐热、耐盐酸、硫酸、硝酸等的浸渍。具高活性,可再生。溶于氢氟酸和强碱溶液,不溶于水

用途:生化研究。吸附剂。脱水剂。有机液体中除去水分。气体干燥剂。杀虫剂

保存:RT

 


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