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呕吐素的主要产生菌是禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum),主要污染小麦、大麦、玉米等谷类作物,也污染粮食制品,人和动物在误食被该素污染的粮谷类后可以产生广泛的性效应。近年来发现DON可能与人类食管癌、IgA肾病有关。DON属于剧或中等物,人畜摄入了被DON污染的食物/饲料后,会导致厌食、呕吐、腹泻、发烧、站立不稳、反应迟钝等急性中症状,严重时损害造血系统造成死亡。研究表明,DON可能对免疫系统有影响,有明显胚胎性和一定致畸作用,可能有遗传性,但无致癌、致突变作用。谷物及饲料中DON的含量有严格的*。我国谷物中DON 的*为1.0 mg/kg 。因此,有必要对其进行有效的监控。HPLC或GC-MS用作检测呕吐素的方法,但是其前处理步骤繁琐,费用昂贵。呕吐素ELISA检测试剂盒则可经济、快速地检测呕吐素。
【注意事项】
1. 室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3. 每种试剂使用前均需摇匀。
4. 反应终止液为2M盐酸,避免接触皮肤。
5. 不要使用过了有效期的试剂盒;也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6. 储存条件:
试剂盒保存于2~8℃,不能冷冻,将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感,因此要避光保存。
7. 试剂变质的迹象:
显色试剂有任何颜色表明显色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
8. 加入显色液后,一般显色时间为15~30min。若颜色较浅,可延长反应时间到35min(或更长),但不得超过40min。反之,则减短反应时间。
9. 呕吐素ELISA检测试剂盒反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。