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玉米赤霉烯酮(Zearaleaone)又称F-2素,是玉米赤霉菌的代谢产物,具有雌激素样作用,具有较强的生殖性和致畸作用,可引起动物发生雌激素亢进症,导致动物不孕或流产,对家禽、猪、牛和羊的影响较大,给畜牧业带来很大的经济损失。
玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒采用竞争ELISA,在微孔板上预包被玉米赤霉烯酮抗原,加入样本/玉米赤霉烯酮标准品溶液及辣根过氧化物酶标记的玉米赤霉烯酮抗体。样本或标准品溶液中的玉米赤霉烯酮与预包被在微孔板上的玉米赤霉烯酮抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的玉米赤霉烯酮抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色,读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物玉米赤霉烯酮抗原的含量成负相关。对照标准曲线,即可得出相应残留物玉米赤霉烯酮的含量。
【注意事项】
1. 室温低于20℃或试剂及样本没有恢复到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD值偏低。
2. 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3. 每种试剂使用前均需摇匀。
4. 反应终止液为0.5M硫酸,避免接触皮肤。
5. 不要使用过了有效期的试剂盒;也不要掺杂使用过了有效期的试剂盒;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6. 储存条件:试剂盒保存于2~8℃,不能冷冻,将不用的微孔板重新真空密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感,因此要避光保存。
7. 试剂变质的迹象:显色试剂有任何颜色表明显色剂变质,应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。
8. 加入显色液后,一般显色时间为15~30min。若颜色较浅,可延长反应时间到35min(或更长),但不得超过40min。反之,则减短反应时间。
9. 玉米赤霉烯酮ELISA检测试剂盒反应温度为25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。