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谷草转氨酶(GOT/AST)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1565
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×2支 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体3.5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体30 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一:提供1个8 mL空瓶;临用前取1支试剂一倒入空瓶中,用2 mL蒸馏水溶解,再用溶液将试剂一残留的试剂润洗下来,现用现配;该试剂为冻干试剂,可能存在肉眼观察试剂量相差较大甚至量很少的现象,此现象不影响使用,实际质量相同;
2、 标准品:20 μmol/mL丙酮酸钠。
产品说明:
谷草转氨酶又叫天门冬*酸氨基转移酶( 2.6.1.1),广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化可逆转氨基反应,是氨基酸代谢的重要酶。此外,GOT在心肌细胞中含量最高,临床上一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。肝脏损害时其血清浓度也可升高。
GOT催化α-酮戊二酸和天门冬*酸发生转氨基反应,生成谷*酸和草酰乙酸,草酰乙酸进一步自行脱羧生成丙酮酸;丙酮酸可与2,4-二*苯肼反应生成2,4-二*苯腙,在碱性条件下显棕红色;测定505nm吸光度的变化,即可计算GOT酶活力。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
参考文献:
Zhao W, Wei H. Effects of cadmium on transaminase activities and structures of tissues in freshwater giant prawn (Macrobrachium rosenbergii) [J]. Journal of Fisheries of China, 1995,19(001):21-27.
Ohgami N, Upadhyay S, Kabata A, et al. Determination of the activities of glutamic oxaloacetic transaminase and glutamic pyruvic transaminase in a microfluidic system[J]. Biosensors and Bioelectronics, 2007, 22(7): 1330-1336.
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