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商品介绍:
测定意义:ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是生物能量通货,能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。测定原理:肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量,以此反应ATP含量。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321126 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
维A;(标准品)英文名: Catharanthine sulfate多巴受体D2抗体包装5g
维E烟酯(标准品)英文名: Catharanthine sulfate多巴受体D1抗体包装100ml
(标准品)英文名: Combretastatin A4 多巴受体相互作用蛋白1抗体包装25ml
维生A醋酯(标准品)英文名: Oxytetracycline凋亡相关蛋白激1抗体包装5ml
维生B1(标准品)英文名: Oxytetracycline凋亡相关蛋白激2抗体包装1g
维生B12(标准品)英文名: Chrysin多巴、cAMP调节磷蛋白抗体包装500mg
维生B3(标准品)英文名: Chrysin磷化多巴/cAMP调节神经磷蛋白抗体包装100g
维生B6(标准品)英文名: Formononetin磷化多巴/cAMP调节磷蛋白抗体包装25g
维生C(标准品)英文名: Formononetin磷化双皮质抗体包装25g
维生C钠(标准品)英文名: Daidzein磷化Disabled 1抗体包装5g
维生K3,萘醌(标准品)英文名: Daidzein磷化Disabled 1抗体包装1g
萎锈灵(标准品)英文名: D(-)-allo-Threonine磷化Disabled 1抗体包装5g
肟菌酯(标准品)英文名: Deoxycorticosterone acetate 双皮质抗体包装25g
乌地尔(标准品)英文名: Deoxycorticosterone acetate D酪激衰减蛋白2抗体包装5g
乌地尔杂质A(标准品)英文名: Tetrahydro-L-Biopterin (dihydrochloride)磷化D酪激衰减蛋白2抗体包装25g
: F298资源名称: 生香毛霉 质量规格:>99%,BR维生B1试剂盒L-色 ; L-Tryptophan
芽胞杆菌Bacillus│sp. 质量规格:HPLC>98%,标准品维生A试剂盒石斛碱;Dendrobine
曲霉Aspergillus│sp. 质量规格:>99%,BR,可用于培养 微管相关蛋白tau试剂盒麝香草; Thymol
ATP含量测试盒50管/24样嗜热链球 乙酰基乙酰对苯同种异体移植炎症因子1Elisa
Ramlibacter tataouinensis 4'--4-氨基二苯转化生长因子β受体1Elisa
产氮假单胞(可定) 单氟磷酸钠聚(ADP核糖)聚合1Elisa
莫哈韦芽孢杆 基磺酰乙型肝炎病表面IgG抗体Elisa
变绿肉座 [1,3-双(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亚基][2-[[(4-基)亚氨基]甲基]-4白介28DElisa
少孢酵母 2--4-氟苯白喉IgG抗体Elisa
盘多毛孢 萘酯电压门控通道抗体Elisa
短小克银汉霉 -5-甲酸甲酯7-脱氢胆固Elisa
酿酒酵母 2-(1-哌基)瘤病16型E6蛋白Elisa
鸡伤寒沙门氏 2-羟基苯并噻唑Elisa
黑曲霉 DL-2-(3-苯氧基)酸/调果酸血红氧合1Elisa
球孢白僵 O-去甲游离型肝炎病核心抗原Elisa
酿酒酵母 2--1,4-萘醌白介8受体αElisa
微杆属 丁酸-1,1-二甲基-2-苯乙酯白介8受体βElisa
产碱假单胞 4-溴-1H-吡咯-2-羧酸甲酯膜铁转运蛋白Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。