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上海市所在地
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶,可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯,以供组织氧化供能和贮存,并在不同的组织表现出不同的生理意义。 测定原理 脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯酚,在400nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321197 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
(标准品)英文名: DL-LysineHHLA1蛋白抗体包装250mg
香蜂草苷(标准品)英文名: DL-Arginine Hydrochloride心肌肌球蛋白重链抗体包装1g
香附(标准品)英文名: L(-)-Carnitine 异质性核糖核蛋白M抗体包装1g
香加皮(标准品)英文名: Levocarnitine;L(-)-Carnitine附睾分泌蛋白4抗体包装5g
香荆芥(标准品)英文名: L-Glutamic acid monosodium salt hydrate铁硫簇整合同源物2蛋白抗体包装1g
香蒲新苷(标准品)英文名: L-Glutamine HIG1区域家族成员2A抗体包装250mg
香薷(标准品)英文名: Glutathione (Reduced);GSH结合珠蛋白/触珠蛋白抗体包装25g
香叶木-7-O-葡萄糖苷(标准品)英文名: Glutathione (Reduced)高迁移率族蛋白B4抗体包装5g
香叶木(标准品)英文名: Glutathione(Oxidized)硫肝糖蛋白1抗体抗体包装1g
香橼(枸橼)(标准品)英文名: DL-Isoleucine叉头蛋白J1抗体包装5g
香橼(标准品)英文名: H-Lys-OH.HCl艾滋病病抗体包装25g
香紫苏(标准品)英文名: L-Ornithine monohydrochloride艾滋病病抗体包装5g
香紫苏内酯(标准品)英文名: L-Aspartic acid艾滋病病抗体包装1g
襄五脂英文名: L-Aspartic acid结合珠蛋白相关蛋白抗体包装5g
(标准品)英文名: L-Cysteine hydrochloride,anhydrousL-组脱羧抗体包装100mg
链霉菌属Streptomyces│sp. 质量规格:>99%,BR糜蛋白绿原;Chlorogenic acid
孟氏假单胞菌Pseudomonas│mandelii 质量规格:HPLC≥98%,标准品锰超氧化物歧化试剂盒罗汉果苷ⅴ;Mogroside V
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格:>99%,BR镁依赖性磷1试剂盒龙胆苦苷;Gentiopicroside
脂蛋白酯酶(LPL)测试盒100管/48样吉氏根瘤 2-氟酸蛋白激AElisa
微球属 3,5-二-2,4-二氟苯蛋白激G-II型Elisa
小托柄鹅膏 1-甲基-1,2,4-三唑丝蛋白HTRA1Elisa
阿魏侧耳 氨噻肟酸乙酯组织谷氨酰转移Elisa
大肠杆 2,3-二甲基H3N2流感Elisa
巴斯德酵母 2,6-二溴苯血红蛋白EElisa
弯曲高温单孢 3,4,6-三哒Ⅰ型血小板反应蛋白7A域Elisa
桑茎点霉 N-Cbz-D-丝百白破抗体Elisa
南方异担子 3-溴-2,4,6-三磺基转移Elisa
烟曲霉 4-溴--氟苯Preptin蛋白Elisa
灰平链霉 柠檬酸锂肉碱脂酰转移1Elisa
枯斑拟盘多毛孢 2,4-二喹唑啉Ⅶ抗体Elisa
食氮嗜异生质 3-乙氧基-4-甲氧基苯甲核仁蛋白14Elisa
汉逊德巴酵母 3-溴-4-Ki-67蛋白Elisa
阪崎肠杆 苄氧基乙Ⅲ型胶原α1Elisa