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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/24样 |
产品货号 | AS6321264 |
商品介绍:
测定意义细胞色素P450酶系是一组主要存在于肝脏的同工酶,药物在动物体内的I相反应主要依赖细胞色素P450酶系催化完成,许多药物能诱导或抑制细胞色素P450系活性,从而引起药物的疗效降低、中毒和残留发生率的增加。AH在P450酶系中相当于CYP2E1亚型,CYP2E1不仅参与了药物的代谢,而且还能催化多种前致癌物和前毒物的活化过程。测定原理AH催化苯胺羟化后产生的4-氨基酚,进一步转变为酚-吲哚复合物,该复合物在630nm处有最大吸收峰。实验中所需仪器及设备:可见分光光度计、普通离心机,低温超速离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水、甘油和冰。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
异莲心碱(标准品)英文名: Ethacrynic acidA型流感病-NS1抗体(神经1)包装5g
异绿原A(标准品)英文名: Maprotiline hydrochloride去肾上腺转运蛋白/神经递质去肾上腺转运体抗体包装250g
异绿原B(标准品)英文名: Hydralazine hydrochloride磷化一氧化氮合成3(内皮型)抗体包装100ml
异绿原C(标准品)英文名: Hydroxyzine dihydrochloride新的饱食分子蛋白抗体包装25ml
异罗汉果皂苷 V英文名: Auranofin脊髓灰质炎病受体相关蛋白4抗体包装1g
异芒果苷(标准品)英文名: TERBUTALINE SULFATE性受体NK-p80抗体包装25g
异牡荆(标准品)英文名: MALTOTRIOSE粘附分子CD112抗体包装5g
异南五味子木脂宁英文名: Procaterol HCl肾小球粘附分子受体抗体包装250mg
异欧前胡(标准品)英文名: Sodium D-pantothenate 成纤维核受体Nr5a2抗体包装100g
异皮啶(标准品)英文名: Nintedanib (BIBF1120)钠钙交换蛋白1抗体包装25g
异去蟛蜞菊内酯英文名: Riboflavin-5-phosphate sodium钠钙交换蛋白3抗体包装5g
异去氢钩藤碱(标准品)英文名: D-(+)-Maltose monohydrate 天冬受体抗体包装25g
异珊瑚菜英文名: Urea磷化核因子2相关因子2(Ser40)抗体包装5g
异鼠李(标准品)英文名: D-BiotinNemo样激抗体包装25g
异鼠李-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷(标准品)英文名: Terfenadine磷化Nemo样激抗体包装5g
黑沙假单胞菌Pseudomonas│sabulinigri 质量规格:>99%,BR碱性成纤维生长因子试剂盒橙皮;Hesperetin
圈卷产色链霉菌浅色变种Streptomyces│ansochromogenes var. pallens 质量规格:HPLC>98%,标准品间皮试剂盒川陈皮;Naringin
地衣芽胞杆菌Bacillus│licheniformis 质量规格:>99%间变性淋巴瘤激试剂盒川续断皂苷Ⅵ;Akebia saponi
苯胺4羟化酶(AH)测试盒50管/24样橙色杆属 2-二氟胰高血糖样肽1Elisa
贝伦格葡萄座腔梨生专化型 4,4'-(1-甲基亚乙基)双(2-)胰高血糖样肽2Elisa
豌豆根瘤 5-溴-2-三氟甲基嘧啶胰脂肪Elisa
氧化节杆 1-乙氧基-4-乙炔基苯乙脱氢Elisa
细孢毛霉 2-溴-1,3-二苯甲乙二1Elisa
植物乳杆植物亚种 五氟酸乙酯乙脱氢Elisa
吸水链霉 1-溴-4-(反式-4-n-戊基环己基)苯乙酰CoAElisa
pMV306hsp+LuxG13(addgene26161) 4-(3-甲氧基氧基)苯甲乙酰CoA羧化Elisa
豌豆根瘤 异丁酰醋酸甲酯乙酰Elisa
枯草芽孢杆 基环戊烷乙酰受体抗体Elisa
立枯丝核 (R)-(+)-2-乙酰氧基琥珀酸酐乙酰酯Elisa
多主葡萄壳 2,7-二羟基-9-芴酮乙酰转移Elisa
食鹿角菜假交替单胞 对十二烷基苯磺酰叠氮乙酰羧化Elisa
番茄枯萎病 1-己基吡啶六氟磷酸盐乙酰肝Elisa
胶冻样类芽孢杆 左炔诺孕酮乙型肝炎E抗原Elisa