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试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍：
测定意义 PDH（EC 4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙ji-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。 测定原理PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原WST-8产生黄色物质，从而导致450nm光吸收的增加。可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS6321143 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
5-羟色盐盐（标准品）英文名： Potassium bicarbonate转录因子E2F-2抗体包装500g
6'''-阿魏酰斯皮诺英文名： Sodium dodecanesulfonate内皮受体蛋白酪激抗体包装250mg
6''-O-二酰基染料木苷英文名： Theophylline酪蛋白激受体B2抗体包装1g
6''-二沙苑子苷单酯英文名： Cellulase磷化雌激受体ER alpha 抗体包装5g
6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷英文名： Chondroitin sulfate重组增强型绿色荧光蛋白抗体包装25ml
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名： Isonicotinic acid雌激受体α抗体（用于western blot）包装5ml
6,7,4'-三羟基异黄英文名： L-Malic acid雌激受体α/β抗体包装25g
6-氧基二氢血根碱英文名： Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌运动因子抗体包装5g
6-氧基山柰-3-O-芸香糖苷英文名： Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受体抗体包装100ml
6-姜(姜辣)英文名： Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗体包装1g
6-姜烯（标准品）英文名： D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻译起始因子4E抗体包装1g
6-羟基(标准品)英文名： Sodium succinate翻译延伸因子EF-1a抗体包装5g
6-基异麦冬黄烷A(标准品)英文名： Hemoglobin磷化雌激受体α抗体包装1g
7,4'-二羟基黄（标准品）英文名： PEG 10000磷化表皮生长因子受体抗体包装1g
7,8-二氢生物蝶呤英文名： DL-Malic acid磷化丝裂原活化蛋白激1抗体包装5g
JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4资源名称: 披发糖多孢菌披发亚种 质量规格：HPLC>98%,标准品髓性核分化抗原试剂盒肉豆蔻;Myristicin
瓦克青霉Penicillium│waksmanii 质量规格：纯度大于99%,R构型髓系触发受体-1试剂盒忍冬苷;Lonicerin
ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC资源名称: 低温乳杆菌 质量规格：>99%髓鞘相关糖蛋白抗体试剂盒日蟾蜍他灵;Gamabufotalin
丙酮酸脱氢酶（PDH)测试盒100管/96样枯草芽孢杆 2--5-吡啶酪蛋白激受体ErbB4Elisa
奇异链霉 (S)-N-苄氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-磷酸化酪蛋白激受体ErbB2Elisa
芽孢杆属 1-辛烯-3-乙酸酯磷酸化酪蛋白激受体ErbB4Elisa
酿酒酵母 吡咯并[2,3-D]嘧啶-4(氢)-酮SMO同系物Elisa
球孢白僵 2,3,5-三氟苄γ分泌Elisa
灰黄浅黄酵母 2,4-二甲基吡咯-3,5-二羧酸乙酯钙粘连蛋白Elisa
疮痂病链霉 2,3,5-三氟苯乙镁离子转运蛋白1Elisa
Corynebacterium sp. 4-溴-alpha-苯乙趋化Elisa
薄层属 1H-吡咯并[2,3-C]吡啶-2-羧酸乙酯胆固-25-羟化Elisa
总状毛霉 1,1,2-氧基乙烷载脂蛋白MElisa
土壤短芽胞杆 Belleau's试剂法尼酯X受体Elisa
米根霉 -1-乙酸肝三酰甘油脂肪Elisa
头孢霉 索那新果糖激Elisa
黑曲霉 2-(苯磺酰基)吡啶抗凝血原抗体Elisa
迂回壳囊孢 环己基肼盐酸盐蛋白酪磷酸Elisa
