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上海市所在地
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 纤维素酶是由微生物产生的多组分的酶系,能水解纤维素β-1,4葡萄糖苷键生成葡萄糖,滤纸酶是其中的一个组分,研究滤纸酶活力对纤维素酶的研究具有非常重要的意义。 测定原理 滤纸酶水解滤纸产生的还原糖能与3,5-二硝基水杨酸生成红棕色氨基化合物,在540nm处有最大光吸收,在一定范围内反应液颜色深浅与还原糖的量成正比,可测定计算得滤纸酶的活力。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/48样 |
产品货号 | AS6321251 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
全蝎(标准品)英文名: 无磷化蛋白激MST1抗体包装1g
全叶青兰(标准品)英文名: Neferine多药耐药相关蛋白9抗体包装250mg
拳参(标准品)英文名: 5-O-Methylvisammioside基质金属蛋白-2抗体包装5g
染料木苷(标准品)英文名: N-Methylcytisine基质金属蛋白2抗体包装1g
染料木/金雀异黄(标准品)英文名: 9-Methoxycamptothecin有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1抗体包装100g
人参(标准品)英文名: 10-Gingerol有丝分裂阻滞缺陷蛋白2抗体包装25g
人参二(标准品)英文名: 6-gingerolβ2微球蛋白抗体包装5g
人参茎叶(标准品)英文名: 8-Gingerol磷化神经上皮酪激/癌激10抗体包装1g
人参芦头(标准品)英文名: ZingeroneE3连接MMS21蛋白抗体包装5g
人参三(标准品)英文名: Zingerone环指蛋白60抗体包装100g
人参皂苷CK(标准品)英文名: 6-Shogaol肌球蛋白轻链7抗体包装25g
人参皂苷F1(标准品)英文名: Gypenoside XLIX心脏肌球蛋白结合蛋白抗体包装5g
人参皂苷F2(标准品)英文名: YM201636肌球蛋白重链9抗体包装1g
人参皂苷F3(标准品)英文名: Poliumoside髓系/淋巴或混合型白血病11抗体包装25g
人参皂苷F4,人参皂苷Rg4(标准品)英文名: Hyperoside干扰诱导GTP结合蛋白MX2抗体包装5g
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:纯度99%抗副流感病IgM抗体试剂盒大黄-8-O-β-D-葡萄糖苷;Rhe
嗜寡养单胞菌Stenotrophomonas│acidaminiphila 质量规格:>95%抗副流感病IgG抗体试剂盒豆腐果苷;Helicid
芽胞杆菌Bacillus│sp. 质量规格:>98%,BR,USP可用于培养抗父体淋巴性抗体试剂盒丁东莨菪碱;Scopolamine
滤纸酶测试盒100管/48样枯草芽胞杆 4-哒羧酸雌二受体Elisa
酿酒酵母 溴化1-基-3-甲基咪唑雌Elisa
朱红丛赤壳 6-甲巯基雌Elisa
长双歧杆 二十四烷雌受体Elisa
小单孢 次氮基三乙酸三钠盐促红生成受体Elisa
枯草芽孢杆 4-溴-3-苯甲促甲状腺Elisa
酿酒酵母 3--2-氟甲苯促甲状腺释放Elisa
孢篮状 3-甲酰促卵泡Elisa
壳 1-苄基-3-酮盐酸盐促肾上腺皮质释放Elisa
干草寒冷杆 5-溴-2-(甲巯基)-4-嘧啶甲酸促肾上腺皮质Elisa
大肠埃希氏 1-溴-4--2,5-二促肾上腺皮质释放因子Elisa
沼泽红假单胞 1-苄基-3-甲酸甲酯促生长释放Elisa
纳塔尔链霉 2-氟-6-羟基吡啶促性腺释放Elisa
大肠埃希氏 异植物催产Elisa
四脊裸胞壳 2,4-二氟二苯甲酮催乳Elisa