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试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义: 糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。 测定原理: 总糖酸水解为还原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物,在过量的NaOH碱性溶液中呈桔红色,在540nm处有最大吸收峰,以此测定样品中的总糖含量。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、沸水浴、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS6321254 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
沙棘(标准品)英文名: Oroxin B激-M2包装100g
沙棘膏(标准品)英文名: Fosfomycin tromethamine间皮抗体包装25g
沙苑子(标准品)英文名: Fosfomycin tromethamine基质金属蛋白-1抗体包装100g
沙苑子苷(标准品)英文名: Cynaroside基质金属蛋白-1抗体包装25g
沙苑子苷A(标准品)英文名: Costundide基质金属蛋白13抗体包装5g
砂仁(阳春砂)(标准品)英文名: Pseudoginsenoside F11基质金属蛋白-14抗体包装100ml
山茶甙A英文名: Pseudoginsenoside RT5基质金属蛋白2抗体包装25ml
山茶甙B英文名: Allantoin基质金属蛋白3抗体包装250mg
山茶苷A英文名: Limonin基质金属蛋白-7抗体包装100mg
山豆根(标准品)英文名: Limonin基质金属蛋白-9抗体包装1g
山风(标准品)英文名: Limonin髓鞘少树突胶质糖蛋白抗体包装500mg
山姜(标准品)英文名: Stearic acid多药耐药相关蛋白1抗体包装10MG
山橿根(标准品)英文名: Stearic acid多药耐药相关蛋白2抗体包装50MG
山腊梅叶(标准品)英文名: Arctigenin多药耐药相关蛋白3抗体包装100g
山蜡梅碱英文名: Arctiin线粒体核糖体蛋白L28抗体包装25g
棒杆菌Corynebacterium│sp. 质量规格:纯度≥98.0%抗表皮基底膜抗体试剂盒大叶茜草;Rubimaillin
链格孢Alternaria│sp. 质量规格:≥850 μg/mg,BR抗斑疹伤寒抗体试剂盒大黄;Emodin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 质量规格:标准品用于含量测定抗白色念珠菌试剂盒胆维他;Anethole trithio
总糖含量测试盒100管/96样沙漠毕赤酵母 2-氨基-4,5-二甲基噻-3-羧酸乙酯谷脱氢Elisa
灰色链霉 2,4-二氟-3-甲谷氨酰Elisa
点枝顶孢 3-甲基烯酰基苯酸Elisa
阿舒假囊酵母 烯酸十八酯S转移A1Elisa
朱红丛赤壳 2,4-二氟-3-S转移Mu1Elisa
*虫拟蜡 苯并氧化呋咱过氧化Elisa
棒弯孢 1-Cbz-氨基环烷羧酸巯基转移Elisa
白腐 可可提取物骨保护Elisa
炭疽盘孢 颜料红254骨成型蛋白2Elisa
仁果丛梗孢 N-Boc-N'-Fmoc-L-赖骨成型蛋白4Elisa
枯草芽孢杆 4-氟-3-甲酰基骨成型蛋白6Elisa
冷海希瓦氏 1-溴-3-氟-5-苯骨成型蛋白7Elisa
费氏中华根瘤 2-溴-6-氟苯甲骨钙Elisa
肉座属 5-羟甲基-1-甲基-1H-吡唑骨碱性磷酸Elisa
大黄欧文氏 5-氨基-6--2-骨桥Elisa