土壤芳基硫酸酯酶(SASF)测试盒100管/48样
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土壤芳基硫酸酯酶(SASF)测试盒100管/48样

土壤芳基硫酸酯酶(SASF)测试盒100管/48样

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-06-20 10:51:05
231
属性:
供货周期:现货;规格:100管/48样;货号:AS6321303;应用领域:化工;主要用途:仅供科研;检测方法:微量法;
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产品属性
供货周期
现货
规格
100管/48样
货号
AS6321303
应用领域
化工
主要用途
仅供科研
检测方法
微量法
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上海抚生实业有限公司

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产品简介

土壤芳基硫酸酯酶(SASF)测试盒100管/48样公司正在出售的产品:BTG2(抗原)Anti-ESPL1 Antibody大鼠晚期糖基化终末产物(AGE)elisa定量检测试剂盒
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详细介绍

商品属性:

产品名称

土壤芳基硫酸酯酶(SASF)测试盒100管/48样

检测方法

微量法

产品规格

100管/48样

产品货号

AS6321303

商品介绍:

测定意义:

土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物,能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫,在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用,是反映土壤质量的一个重要生物学指标。

测定原理:

S-ASF能够催化对-硝基ben硫酸钾生成对-硝基ben酚,后者在410nm有特征光吸收。

自备用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。

自备仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

NAD+和NADH的提取:

1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建

议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);

冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中

和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。

NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建

议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);

冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中

和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、组织中NAD+和NADH的提取:

NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g

组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴

中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。

NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g

组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴

中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,

混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。

3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取:

NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性

提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液),

超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min

(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加

入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。

NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱

性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液),

超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min

(盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加

入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。

ADH测定操作:

1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。

4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。

注意:空白管只需测定一次。

注意事项:

①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。

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