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试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍:
测定意义 速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分,包括全部水溶性磷、部分吸附态磷及有机态磷,土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。 测定原理 用双酸法提取酸溶性磷和吸附态磷,用钼锑抗比色法测定。 自备实验用品及仪器 天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、震荡仪。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321332 |
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
水稻黄单胞菌(水稻白叶枯菌)*癌相关蛋白1抗体Human GABRA3 ELISA Kit小鼠8异前列腺F2α(8-iso-PGF2a)免疫试剂盒
金霉链霉菌Bcl2样凋亡蛋白9抗体Human GABRB1 ELISA Kit小鼠8异前列腺(8-iso-PG)免疫试剂盒
巨兽芽孢杆菌BTB/POZ结构域蛋白10抗体Human GABRD ELISA Kit小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)免疫试剂盒
三叶草根瘤菌BTB/POZ结构域蛋白17抗体Human GABRG1 ELISA Kit小鼠6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)免疫试剂盒
香菇BTB/POZ结构域蛋白19抗体Human GABRG2 ELISA Kit小鼠6前列腺(6-K-PG)免疫试剂盒
大丽轮枝霉BXDC2蛋白抗体Human GADD34 ELISA Kit小鼠5羟色受体2A(5-HTR 2A)免疫试剂盒
长根小奥德蘑BOLA1蛋白抗体Human GAB3 ELISA Kit小鼠5羟色(5-HT)免疫试剂盒
里微球菌BOLA2蛋白抗体Human GADD45A ELISA Kit小鼠5羟基乙(5-HIAA)免疫试剂盒
酿酒酵母杀菌通透性增加蛋白样1抗体Human GABARAP ELISA Kit小鼠5羟二十碳四烯(5-HETE)免疫试剂盒
拟茎点霉杀菌/通透性增加蛋白样2抗体Human GABARAPL1 ELISA Kit小鼠5核苷(5-NT)免疫试剂盒
长盐土生古菌嗜乳脂蛋白样3抗体Human GABPB2 ELISA Kit小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌杀菌/通透性增加蛋白样3抗体Human FXYD6 ELISA Kit小鼠4-羟基壬烯(HNE)免疫试剂盒
苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种BRD1蛋白抗体Human GABARAPL2 ELISA Kit小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)免疫试剂盒
蟹枝毛壳BRPF3蛋白抗体Human FXYD4 ELISA Kit小鼠Ⅲ型前胶原基端肽(PⅢNT)免疫试剂盒
矮小伞枝霉BXDC1蛋白抗体Human FXYD3 ELISA Kit小鼠Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)免疫试剂盒
苏云金芽胞杆菌多窝亚种脑蛋白44抗体Human FXYD7 ELISA Kit小鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免疫试剂盒
黄海芽孢杆菌Bacillus│marisflavi 质量规格:>96%,BRαS转移试剂盒1-羟基-2,3,4,7-四氧基山山
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:>98%,BRα干扰试剂盒去基川陈皮
香鱼假单胞菌Pseudomonas│plecoglossicida 质量规格:>97%,BRα-辅肌动蛋白4试剂盒芹菜-7-O-葡萄糖苷
酸性土壤速效磷测试盒50管/48样布鲁氏 生物Ⅱ型 3,3-二甲基-4-戊烯酸甲酯Tau蛋白Elisa
盘长孢状盘孢 贝丁酯Toll样受体2Elisa
副猪嗜血杆 3--4-氨基吡唑盐酸盐Toll样受体4Elisa
粉红单端孢霉 6-甲氧基-2-(4-甲氧苯基)苯并噻吩Toll样受体9Elisa
Oerskovia enterophila 2-噻吩甲T亚群Elisa
意大酵母 4-羟基间苯二甲酸V型ATPElisa
布鲁氏 生物Ⅴ型 2-溴-5-甲氧基WNT抑制因子1Elisa
金霉链霉(生金色链霉) 5-溴-2-甲氧基苯α1酸性糖蛋白Elisa
无 2-氨基-4--5-α1-微球蛋白Elisa
圆酵母属 2--5-氨基α7型神经烟碱能受体Elisa
白色弯曲嗜酸 4--5-嘧啶αL岩藻糖苷Elisa
赤霉属 3-甲氧基羰基苯磺酰α-氨基羟甲基恶唑酸Elisa
大肠埃希氏 2-氨基-5-α淀粉Elisa
枝状枝孢 6-庚炔α-防御Elisa
节杆 2,5-二氢吡咯盐酸盐α干扰Elisa