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商品介绍:
测定意义LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。对于人来说,主要是胰脂肪酶,分解食物中脂肪形成单酰甘油和游离脂肪酸,被人体吸收并重新合成脂肪。外源性脂质摄入过多是引发肥胖的重要原因,血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。测定原理LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。实验中所需仪器和用品甲苯、无水乙醇、研钵、冰、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪和双蒸水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321181 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
去斑蝥钠(标准品)英文名: 1-Tridecene γ-微管蛋白GCP4抗体包装5g
去碱盐盐(标准品)英文名: 1-Tetradeceneγ-微管蛋白GCP6抗体包装500g
去氧基姜黄英文名: 1-Pentadeceneβ-葡萄糖苷1抗体包装100ml
去氧基姜黄(标准品)英文名: 1-Hexadecene甘裂解系统H蛋白抗体包装25ml
去氧基麻醉椒英文名: 1-Heptadecene15号染色体开放阅读框58抗体包装25g
去异波尔定(标准品)英文名: 1-Nonadecene淀粉结合域蛋白1抗体包装5g
去泽木(标准品)英文名: 2-Bromo-4'-phenylacetophenone延伸因子G1抗体包装100g
去芹菜糖桔梗皂苷D(标准品)英文名: Dabsyl Chloride β葡萄糖苷2抗体包装25g
去芹糖桔梗皂苷D3英文名: O-4-Nitrobenzylhydroxylamine Hydrochlorideβ葡萄糖苷3抗体包装100g
去氢厄弗英文名: 7-Acetoxy-4-bromomethylcoumarin胶质母瘤相关蛋白GBAS抗体包装1g
去氢二异丁香(标准品)英文名: Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)红糖苷α1抗体包装25g
去氢茯苓英文名: 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one G蛋白结合蛋白1抗体包装5g
去氢钩藤碱(标准品)英文名: 4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin G蛋白结合蛋白4抗体包装1g
去氢毛钩藤碱英文名: DBD-CO-Hz [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methyl)amino-2,1,3-benzoxadiazole] G蛋白结合蛋白6体包装25g
去氢木香内酯(标准品)英文名: NBD-CO-Hz [=4-(N-Hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 鸟苷环化激活蛋白1抗体包装5g
结核分枝杆菌Mycobacterium│tuberculosis 质量规格:>99%,标准品,一合物凝溶胶蛋白试剂盒木蝴蝶苷A;Oroxin A
皱盖假芝(血芝)Amauroderma│rude 质量规格:>99%,BR,一合物凝聚试剂盒漏芦甾;Rhapontisterone
斜卧青霉Penicillium│decumbens 质量规格:>99%,USP31,可用于培养柠檬合成,线粒体试剂盒罗汉果甜IV;Mogroside IV
脂肪酶(LPS)测试盒50管/48样暗盖淡鹅膏 1,3-二甲基尿酸弹性蛋白抑制剂Elisa
巨大芽胞杆 3-氨基-2-羟基吡啶甲胎蛋白异质体Elisa
耐久肠球 2-氨基-5-PSD95Elisa
塔宾曲霉 4-溴叔丁酯核心结合因子β亚基Elisa
分枝节杆 Chloro[(S)-(-)-5,5'-bis(diphenylphosphino)-4,4'-bi磷酸化蛋白酪激JAK-2Elisa
浅天青链霉 3-溴-1-苯并髓触发受体2Elisa
Sporosarcina 4-乙酸乙酯白血病抑制因子受体Elisa
盘长孢状盘孢 米索前列固调节因子结合蛋白2Elisa
浅白隐球酵母 8-溴-4-羟基-2-三氟甲基喹啉周期I2Elisa
豌豆根瘤 甲基4-乙酰-2-乙氧基苯甲脂周期蛋白E2Elisa
棉阿舒囊霉 6-溴-1-甲基吲唑C反应蛋白单体Elisa
Lactobacillus brevis 3-溴-2-三氟双烯雌Elisa
柠檬色短小杆 2-巯基-S-硫代苯甲酰乙酸己烷雌Elisa
游动放线* 酸-S-糠基硫代酯假尿苷酸合1Elisa
格氏嗜盐碱杆 2-氨基-4-苯甲酰β-羟基类固脱氢2Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。