CytoTrace^TM Red Fluorescent Probe

细胞质红色荧光探针

产品信息

产品描述

CytoTrace^TM Red Fluorescent Probe细胞质红色荧光探针可以轻易穿透活细胞膜进入细胞内，转变成不具细胞渗透性的反应产物，发出较强荧光信号。随着细胞的传代增殖，该染料会转移到子细胞而非群体中相邻的细胞中，同时染料荧光信号至少可以保持72 h，该染料显示出较理想的示踪性能。CytoTrace^TM Red Fluorescent Probe染料表现出无毒、稳定、荧光信号持续时间长，且在生理PH环境中有明亮的荧光特性。此外，染料的激发和发射波长分别是E_x=577 nm和E_m=602 nm，发出红色荧光，可以很好的与发出绿色荧光蛋白GFP一起使用，实现多重荧光检测。

产品性质

运输和保存方法

常温运输。粉末直接保存于-20 ºC，有效期18个月。用DMSO溶解配置成储存液，建议分装后-20 ºC避光保存，避免反复冻存，至少可存放6个月。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）粉末溶解前请先短暂离心，以保证产品在管底。

3）本产品仅用于科研用途，禁止用于人身上。

使用方法

1.储存液的配制

本品是以粉末形式提供，使用前需将本品回温至室温。使用细胞培养级别的无水DMSO，向50 µg粉末加入36 µL的DMSO，充分溶解至终浓度2 mM。可根据单次的使用量将储存液分装后放到-20 ºC避光，避免反复冻融。

2.工作液的配制

根据不同的实验目的使用不同的探针浓度，以下的起始操作条件仅作参考，可根据细胞类型和其他的相关因素如细胞或组织的透化等进行适当调整。

用适当的缓冲液（HHBS\PBS\DPBS等）或者无血清培养基稀释储存液至工作液浓度。例如，制备1~20 μM染料工作溶液，通过涡旋混合均匀。

3.染色及检测

3.1在培养皿/瓶内加入适量的培养基培养细胞，当细胞长至所需丰度，准备离心细胞；

3.2离心细胞，每管大约2~10×10⁵个细胞；

3.3向细胞中加入大约500 μL体积、37 ℃预热的CellTrace™ Red CMTPX染色工作液，在所使用细胞正常培养条件下避光、孵育细胞15~30 min。（///佳孵育时间需优化）；

3.4染色结束后，吸出染料，用适量的预热缓冲溶液（例如PBS）清洗细胞2~3次。将细胞细胞重悬于500 μL预热的缓冲溶液或培养基中，得到2~10×10⁵个细胞；

3.5用荧光显微镜、共聚焦显微镜、或流式细胞仪（FL1通道）检测E_x/E_m = 577/602 nm处的荧光信号变化。

注意：

1）该染料适用于贴壁细胞和悬浮细胞；

2）对于细菌细胞染色：细菌过夜生长预处理的营养肉汤中1：800稀释储备溶液时，染色是///有效的，也可以使用新鲜牛肉膏或PBS稀释。细菌悬浮液可以用PBS稀释至每毫升10⁵~10⁷个生物。可以将1 mL细菌溶液加到0.45 μm过滤器（25 mm）并真空过滤除去溶液，然后加入1 mL染料溶液并在室温下孵育5~10 min染色细菌。

参考文献

[1] Caetano-Pinto P, Janssen MJ, et al. Fluorescence-Based Transport Assays Revisited in a Human Renal Proximal Tubule Cell Line. Mol Pharm .2016,933.

[2] Manna A, De Sarkar S et al. The variable chemotherapeutic response of Malabaricone-A in leukemic and solid tumor cell lines depends on the degree of redox imbalance[J]. Phytomedicine, 2015, 22(7-8):713-723.

[3] Zhang C, Jin S, et al. Cell Membrane tracker based on restriction of intramolecular rotation[J].ACS Applied Materials & Interfaces,2014,6(12):8971-8975.

[4] Rezatofighi S H , Gould S, et al. A multiple model probability hypothesis density tracker for time-lapse cell microscopy Sequences[J]. 2013.

[5] Beem E , Segal M S . Evaluation of stability and sensitivity of cell fluorescent labels when used for cell migration[J]. Journal of Fluorescence, 2013, 23(5):975-987.

相关产品

HB210316