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DAPI 4’,6-联脒-2-苯基吲哚
面议Protein A/G Agarose Beads 蛋白A/G琼脂糖珠
面议Bovine Serum Albumin(BSA), DNase, Protease, IgG Fr
面议Anti-Flag亲和纯化凝胶
面议InStab™ Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×,
面议HieffLongTaqDNAPolymerase长片段DNA聚合酶
面议Timentin(特美//汀)
面议dNTP Mix (10 mM each)
面议Peroxidase-Conjugated Goat Anti-Mouse IgM , µ
面议Bovine Serum Albumin(BSA), Fatty Acid Free 牛
面议GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF 谷胱甘肽高速纯化树脂
面议琼脂糖树脂(GST标签蛋白纯化)
¥698
jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent
jetOPTIMUS® DNA体外转染试剂
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent jetOPTIMUS® DNA体外转染试剂 | 117-01 | 0.1 mL | 835.00 |
117-15 | 1.5 mL | 6855.00 |
产品描述
jetOPTIMUS®是Polyplus公司生产的一款///佳的DNA转染试剂,具有阳离子纳米结构,针对难转染的细胞系,包括原代细胞、干细胞、巨噬细胞等都有很高的转染效率。jetOPTIMUS®通过增加细胞摄取DNA的量,实现了原代细胞、干细胞较高的转染效率。实验结果发现,在一定的生理条件下,只需要少的DNA和转染试剂用量,都可以实现高的转染水平,且细胞毒性小,保持了细胞的活力状态。
按照标准方案,1.5 mL jetOPTIMUS®转染试剂足以在24孔板中进行750次转染 (DNA:试剂比例=1:1)。除此之外,也可根据转染的细胞系、核酸种类、转染时间等,登录Polyplus公司的网///址,搜索该产品引文数据库。Polyplus数据库提供了400多种的转染条件数据,Polyplus:w/w/w.polyplus transfection.c/o/m.
产品组分
组分 | 产品编号/规格 | ||
117-01 | 117-07 | 117-15 | |
jetOPTIMUS® Reagent | 0.1 mL | 0.75 mL | 1.5 mL |
jetOPTIMUS® Buffer | 10 mL | 2×60 mL | 4×60 mL |
运输与保存方法
冰袋(wet ice)运输。产品4 ºC保存,一年有效。不可冷冻!
注意事项
1)该转染试剂可以满足多质粒共转染,共转染时,每孔/板的总DNA量不应超过表2所示DNA的数量。且每个质粒的量不少于10%的DNA总量。
2)制备复合物时,一定要用试剂盒里的jetOPTIMUS® 缓冲溶液稀释DNA。禁止使用无血清培养基稀释DNA。
3)若稳定转染基于质粒的CRISPR/Cas9基因组编辑,建议联系polyplus的科学支持团队:support@polyplus-transferion.c/o/m。
4)jetOPTIMUS®转染试剂应该在4 ºC保存,要注意避免多次反复长时间开盖,否则可能会导致转染试剂挥发,降低转染效率。
5)转染前一天,确保接种贴壁细胞密度在60%-80%,对于一些小细胞和生长缓慢的细胞,接种密度可适当扩大2倍。
6)该产品只适合体外转染,不能用于体内转染。
操作流程(以24孔板和转染0.5 μg的DNA为例)
1.接种细胞
为了保证jetOPTIMUS®转染试剂达到///佳转染效率,建议转染时细胞密度建议60%-80%左右。通常在24孔板,每孔5万个贴壁细胞接种在500 µL*生长培养基中,培养24小时后进行转染。其他培养板细胞数量请参考表1
表1转染前一天,接种的细胞数量参考值
培养皿 | 每孔的表面积 (cm²) | 每孔接种细胞的数量 | 生长培养基体积(mL) |
96孔板 | 0.3 | 7.5×103 ~2.5×104 | 0.125 |
24孔板 | 1.9 | 4×104 ~ 1×105 | 0.5 |
6孔板 | 9.4 | 1.5 ×105~ 4×105 | 2 |
25cm2培养瓶 | 25 ~ 28 | 2 ×105~ 8.5×105 | 5 |
75cm2培养瓶 | 75 ~ 78.5 | 1×106 ~ 4×106 | 10 |
2.加入转染试剂(转染试剂、DNA用量与培养皿大小有关系,请参考表2)
表2根据培养皿的大小,转染试剂、DNA用量参考值
培养皿 | jetOPTIMUS®缓冲溶液的体积(µL) | 每孔DNA的含量(μg) | jetOPTIMUS®转染试剂体积(µL) | 培养基体积 (mL) |
96孔板 | 12.5 | 0.13 | 0.13 ~ 0.19 | 0.125 |
24孔板 | 50 | 0.5 | 0.5 ~ 0.75 | 0.5 |
6孔板 | 200 | 2 | 2~ 3 | 2 |
25 cm2培养瓶 | 500 | 4 | 4 ~ 6 | 5 |
75 cm2培养瓶 | 1000 | 10 | 10 ~ 15 | 10 |
【注】:除此之外,客户也可以根据自身条件需求,调整转染试剂的体积/DNA的浓度。我们建议测试DNA:jetOPTIMUS®试剂比值=1:1~1:1.5(µgDNA:µlRepeagent),具体条件和优化指南请参考表3
表3 转染当天,根据培养皿的大小的优化指南
培养皿 | jetOPTIMUS®缓冲溶液的体积(µL) | 每孔DNA的含量(μg) | jetOPTIMUS®转染试剂体积(µL) | 培养基体积 (mL) |
96孔板 | 12.5 | 0.10~ 0.20 | 0.10 ~ 0.30 | 0.125 |
24孔板 | 50 | 0.25 ~ 0.75 | 0.25 ~ 1 | 0.5 |
6孔板 | 200 | 1 ~ 3 | 1 ~ 4.5 | 2 |
25 cm2培养瓶 | 500 | 2 ~ 6 | 2 ~ 9 | 5 |
75 cm2培养瓶 | 1000 | 5 ~ 15 | 5 ~ 22 | 10 |
在我们的细胞转染数据库中可以找到许多细胞类型的具体条件,如下:w/w/w.polyplus-transferion.c/o/m/resources/cell transferion database/。
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