Hifair® V Reverse Transcriptase

11301ES12Hifair® V Reverse Transcriptase

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-02-09 15:59:37
739
属性:
供货周期:现货;规格:12 KU;货号:11301ES12;应用领域:生物产业;
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产品属性
供货周期
现货
规格
12 KU
货号
11301ES12
应用领域
生物产业
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品简介

Hifair® V Reverse Transcriptase是在Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。

详细介绍

Hifair® V Reverse Transcriptase

第五代耐热逆转录酶(无甘油版)

 

产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶(无甘油版)

11301ES12

12 KU

1952.00

Hifair® V Reverse Transcriptase 第五代耐热逆转录酶(无甘油版)

11301ES75

300 KU

28652.00

 

产品描述

 

Hifair® V Reverse Transcriptase是在Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase基础上通过基因工程技术得到的全新逆转录酶,与Hieff® M-MLV (H-) Reverse Transcriptase相比,其热稳定性大幅度提高,可耐受高达60℃的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。Hifair® V Reverse Transcriptase合成全长cDNA的能力也有了提升,可扩增长达10 kb的cDNA

 

产品组分

 

编号

组分

产品编号/规格

11301ES12 (12 KU)

11301ES75 (300 KU )

11301-A

Hifair® V Reverse Transcriptase (600 U/μL)

20 μL

500 μL

 

产品应用

 

一步法RT-qPCR;基因克隆;荧光定量。

 

活性定义

 

以Poly(A) .Oligo(dT)为模板-引物,在37℃,10 min内,将1 nmol的dTTP掺入为酸不溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。

 

质量控制

 

核酸外切酶残留检测:200 U本酶和1 μg λDNA-Hind Ⅲ,37℃下孵育1 h,DNA的电泳谱带不发生变化。

核酸内切酶残留检测:200 U本酶和1 μg Supercoiled pBR322 DNA,37℃下孵育1 h,DNA的电泳谱带不发生变化。

RNase残留检测:200 U本酶和1 μg小鼠肝脏总RNA,37℃下孵育1 h,RNA电泳谱带不发生变化。

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。4℃保存。效期6个月。

 

注意事项

 

1)请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染;

2)所有操作均应在冰上进行,防止RNA降解;

3)为保证高效率逆转录,建议使用高质量的RNA样本;

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

第—链cDNA合成操作步骤

1. RNA变性(此步为可选步骤,RNA变性有助于打开二级结构,可在很大程度上提高第—链cDNA的产量。)

组分

使用量

RNase free ddH2O

To 13 μL

Oligo (dT)18 (50 μM)

or Random Primers (50 ng/μL)  

or Gene Specific Primers (2 μM)

1 μL

or 1 μL

or 1 μL

模板RNA

Total RNA: 1 ng -5 μg或mRNA:1 ng-500 ng

65℃加热5 min,迅速置于冰上冷却2 min。简短离心收集反应液后,加入下表中的逆转录反应液,并轻轻吹打混匀。

2. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

组分

使用量

上一步的反应液

13 μL

5×Hifair® V Buffer

4 μL

dNTP Mix (10 mM)

1 μL

Hifair® V Reverse Transcriptase (600 U/μL)

200 U

RNase inhibitor (40 U/µL)

1 μL

RNase free ddH2O

To 20 μL

3. 逆转录程序设置

温度

时间

25℃

5 min

42℃

15-30 min

85℃

5 min

【注】:1)当使用Random Primers时,需25℃,孵育5 min;若使用Oligo (dT)18或Gene Specific Primers,此步可省略。

2)逆转录温度:推荐使用42。对于高GC含量模板或者复杂二级结构的模板,可将逆转录温度提高至50-55℃。

3)85℃加热5 min,目的是使逆转录酶失活。

逆转录产物可立即用于后续PCR或qPCR反应,也可-20℃短期保存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。

 

相关产品

 

产品名称

货号

规格

(元)

Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂

10603ES05/10

2/10 KU

216/916

Hieff® HotStart Taq DNA Polymerase(配体法热启动DNA聚合酶)

10110ES72/80

250/1000 U

186/636

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase(抗体法热启动Taq酶)

10113ES60/76

100/500 U

216/656

Hieff Unicon® qPCR TaqMan Probe Master Mix

11205ES08

5 mL

740

Hieff Unicon® TaqMan multiplex qPCR master mix

11208ES08

5 mL

5565

Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 热敏UDG

10303ES60/76

100/500 U

683/3083

dUTP, 100mM Solution 脱氧尿苷三磷酸溶液(100 mM)

10128ES72/80

0.25/1 mL

253/853

dNTP Mix (25 mM each)

10125ES72/80

0.25/1 mL

116/353

Hifair® VReverseTranscriptase 第五代耐热逆转录酶

11300ES92/93

10000U/50000U

1623.00/5623.00

HB200407

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