Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix

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326 1

具体成交价以合同协议为准
2023-02-22 17:20:18
1608
属性:
供货周期:现货;规格:10 T;货号:11141ES10;应用领域:化工,生物产业,地矿;
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供货周期
现货
规格
10 T
货号
11141ES10
应用领域
化工,生物产业,地矿
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品简介

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix 包含5×gDNA digester Mix和4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus。5×gDNA digester Mix可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠

详细介绍

产品信息

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix  for qPCR (gDNA digester plus)

11141ES10

10 T

326.00

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix  for qPCR (gDNA digester plus)

11141ES60

100 T

798.00




产品描述

Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)基于Hifair® Reverse Transcriptase而开发的即用型预混液。与Hifair® Reverse Transcriptase相比,Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase热稳定性大幅度提高,可耐受高达60的反应温度,适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时,该酶增强了与模板的亲和力,非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录

该预混液包5×gDNA digester MixHifair® Ⅲ SuperMix plus5×gDNA digester Mix可去除RNA模板中残留的基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠。Hifair® Ⅲ SuperMix plus 含有逆转录反应所需的所有组分(BufferdNTPHifair® Ⅲ Reverse TranscriptaseRNase inhibitorRandom primers/ Oligo (dT)18 primer mix),只需加入RNA模板和 RNase-free H2O即可进行逆转录反应,并同时终止gDNA digester的作用,保证cDNA的完整性。

该产品适用于两步法RT-qPCR检测,针对qPCR进行特别优化,比例优化的Random primers/ Oligo (dT)18 primer mix,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始,并具有相同的逆转录效率,保证了qPCR结果的真实性和可重复性。逆转录产物兼容SYBR®Green和探针法qPCR,可以根据实验目的,选择Hieff UNICON® qPCR SYBR® Green Master MixHieff® qPCR SYBR® Green Master MixHieff® qPCR TaqMan Probe Master Mix等试剂配合使用,进行高性能的基因表达分析。

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

11141ES10 (10 T)

11141ES60 (100 T)

11141-A

RNase-free H2O

1 mL

2×1 mL

11141-B

5×gDNA digester Mix

30 μL

300 μL

11141-C

4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus

50 μL

500 μL

】:4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus含有gDNA digester抑制剂。

产品应用

适用于两步法RT-qPCR

运输保存方法

冰袋运输。-20保存有效期18个月。

注意事项

1)5×gDNA digester Mix和4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus含有高浓度的甘油,使用前请短暂离心收集到反应管底部,并用移液枪轻轻吸打充分混匀后,准确吸取;

2)如果加入RNA模板体积较大 (如超过2 μL),请确保RNA是溶于水中而不是TE中,因为TE会对gDNA去除以及逆转录反应产生抑制;

3)可以不经过基因组去除步骤,直接用4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus进行逆转录,这样所得到的结果会与使用Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix  (Cat .11137ES) 效果一致。但是请勿将gDNA digester与11137ES中的Hifair® Ⅲ SuperMix配套使用,因其不含终止gDNA digester反应的成分,会影响反转录和后续的qPCR实验;

4)反应液的配制应在冰上操作完成,操作过程应避免RNase污染;

5)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作;

6)本产品仅作科研用途!

第一cDNA合成操作步骤

1. 残留基因组DNA去除

RNase free离心管中配制如下混合液,用移液器轻轻吹打混匀。42℃孵育2 min

组分

使用量

RNase-free H2O

To 15 μL

5×gDNA digester Mix

3 μL

Total RNA

10 pg -5 μg*

or mRNA

10 pg-500 ng*

【注】:* 20 μL逆转录反应体系建议Total RNA的投入量不超过1 μg。如果目的基因的表达丰度低,最多投入5 μg Total RNA,否则RNA投入量过高,可能会超过后续定量PCR的线性范围。

2. 逆转录反应体系配制(20 μL体系)

在第1步的反应管中直接加入4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus,用移液器轻轻吹打混匀。

使用量

1步的反应液

15 μL

4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus

5 μL

3.逆转录程序设置

温度

时间

25℃

5 min

55℃

15 min

85℃

5 min

】:逆转录温度:推荐使用55℃。对于GC含量模板或者复杂模板,可将逆转录温度提高到60℃

逆转录产物可立即用qPCR应,也-20短期存,若需长期保存,建议分装后,于-80℃保存,避免反复冻融。


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货号

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