12928ESHieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polym
Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
Hieff NGS™ DNA分选磁珠
面议Hieff NGS® Ultima Pro PCR Free DNA Library Pr
¥2475Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit
面议phi29 DNA Polymerase (10 U/μL)
¥585Recombinant Ten-Eleven Translocase
¥1555Recombinant Ten-Eleven Translocase (TET)14
¥1555Recombinant APOBEC3A (A3A) Protein
¥13354×Multiplex PCR Master Mix for Pathogen
¥725Hieff NGS® G-Type In-Situ DNA Binding Profili
¥2855E. coli DNA ligase (60 U/μL)
¥554× Frag/Prime Buffer
¥102Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for
¥3155Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix是即用型2×预混溶液,包含Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase,dNTP以及对高通量测序文库扩增而精心优化的缓冲体系,具有灵敏度高、特异性强、保真性好等优点。在进行扩增反应时,体系只需加入引物和模板即可,简化了实验操作步骤,减少了人为误差,提高了实验通量和结果的重复性。本产品提供是所有试剂组分均经过严格质检,最高程度保障产品优异性能和批次间稳定性。
产品信息
货号 | 12928ES30 |
规格 | 5mL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期1年。
使用说明
使用说明正文
文库扩增反应体系(冰上配制)
将表1中试剂解冻后颠倒混匀,置于冰上备用。
于无菌PCR管中配制表1所示反应体系。
表1. PCR扩增反应体系
组分 | 体积 (µL) |
模板DNA | X |
正向引物 (10-25 μM) | 1-2.5 |
反向引物 (10-25 μM) | 1-2.5 |
Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polymerase mix | 25 |
ddH2O | Total to 50 |
使用移液器轻轻吹打货震荡混匀,并短暂离心将反应液收集至管底。
将PCR管置于PCR仪中,设置表2所示反应程序,进行PCR扩增。
表2. PCR扩增反应程序
温度 | 时间 | 循环数 |
98°C | 1 min | 1 |
98°C | 10 sec | 1-15(根据实验要求) |
60°C | 30 sec | |
72°C | 30 sec | |
72°C | 5 min | 1 |
4°C | Hold | - |
【注】:
1)预变性温度推荐使用98°C。预变性推荐时间:质粒DNA等简单模板为30 sec;文库为1 min;cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min;高GC含量模板为5-10 min。
2) 退火温度推荐使用60°C,也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间为20 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3) 延伸温度和时间:推荐使用72°C,延伸时间根据实际需要进行调整。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。