Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit

12603ES24Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2021-09-27 15:10:38
1332
属性:
供货周期:现货;规格:24T;货号:12603ES24;应用领域:医疗卫生,化工,生物产业;
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产品属性
供货周期
现货
规格
24T
货号
12603ES24
应用领域
医疗卫生,化工,生物产业
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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产品简介

Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit是翊圣生物自主研发的专门用于纯化mRNA的磁珠试剂盒。其中的mRNA Capture beads为偶联了Oligo(dT)的微米级顺磁性微球,通过与带有poly(A)尾巴的mRNA相结合,将mRNA从0.1-4 μg完整度良好的总RNA中进行分离纯化。

详细介绍

产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit

mRNA纯化试剂盒

12603ES24

24 T

616

12603ES96

96 T

2266

 

产品描述

 

Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit是翌圣生物自主研发的专门用于纯化mRNA的磁珠试剂盒。其中的mRNA Capture beads为偶联了Oligo(dT)的微米级顺磁性微球,通过与带有poly(A)尾巴的mRNA相结合,将mRNA从10 ng-4 μg完整度良好的总RNA进行分离纯化。

 

产品组分

 

产品组分

组分名称

12603ES24

12603ES96

12603-A

mRNA Capture Beads

1.2 mL

4.8 mL

12603-B

Beads Binding Buffer

1.2 mL

4.8 mL

12603-C

Beads Wash Buffer

15 mL

60 mL

12603-D

Tris Buffer

1.2 mL

4.8 mL

12603-E

Nuclease-free water

1 mL

4 mL

 

运输与保存方法

 

冰袋运输。

2-8℃保存,有效期一年。避免冷冻!

 

注意事项

 

1.磁珠使用前务必要回温至室温,并充分混匀,否则可能影响样品的回收效率。

2.操作过程要严格保证无RNase和核酸污染。

3.本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

4.想要获得好的纯化效果,需要有完整度良好的总RNA,确保RIN值在7.0及以上。

5.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

6.本产品仅用作科研用途!

 

使用方法

 

一、自备材料

磁力架,Nuclease-free离心管。

二、操作流程


图片1.jpg

.mRNA纯化试剂盒操作流程


三、操作步骤

3.1 实验前准备

mRNA Capture Beads2-8℃取出,静置使其温度平衡至室温(约30 min)。

3.2 样本准备

在一个Nuclease-free PCR管中,用Nuclease-free water将10 ng-4 μg总RNA稀释至50 μL,冰上放置备用

3.3 mRNA与磁珠的结合

① 颠倒或涡旋振荡混匀磁珠,吸取50 μL磁珠悬液加入至50 μL 总RNA样品中,用移液器反复吹打6次,

使其充分混匀。

② 将磁珠与RNA的混合物置于PCR仪中,65℃,5 min;25℃,5 min;25℃,hold,完成RNA与捕获磁珠的结合。

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,使mRNA与总RNA分离,小心移除上清。

3.4 样本的洗涤

① 将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以*混匀。

② 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

③ 重复上一步骤,共洗涤两次。

3.5 mRNA样本第一轮洗脱

① 将样品从磁力架上取出,加入50 μL Tris Buffer重悬磁珠,用移液器反复吹打6次以*混匀。

② 将样品放置于PCR仪中,80℃,2 min;25℃,hold,将mRNA洗脱下来。

3.6 mRNA与磁珠的再次结合

① 将样品从PCR仪中取出,加入50 μL Beads Binding Buffer,用移液器反复吹打6次以*混匀。

② 室温孵育5 min,使mRNA结合到磁珠上。

③ 将样品置于磁力架中,室温静置5 min,小心移除上清。

3.7 样本的洗涤

将样品从磁力架上取出,加入200 μL Beads Wash Buffer重悬磁珠,用移液器反复吹打6次*混匀,将样品重新放回至磁力架中,室温静置5 min,然后吸除全部上清。

【注】:最后需要用10 μL移液器吸干净残留液体。

3.8 mRNA样本终洗脱

方案一:用于逆转录反应。

将样品从磁力架上取出,加入12 μL Nuclease-free water重悬磁珠,用移液器吹打6次以*混匀。将样品置于PCR仪中80℃,2 min后,立即置于磁力架上,室温静置5 min。待溶液澄清后,小心吸取10 μL上清至另一新的Nuclease-free PCR管中。

方案二:用于RNA文库的构建。

可根据相关试剂盒说明书加入相应体积的Frag/Primer Buffer,进行文库构建。

【注】:样品可置于冰上继续进行NGS文库构建或其他分析应用(建议立即进行后续反应),也可以置于-80℃保存。

 

 

HB210923

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