Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
Hieff NGS™ DNA分选磁珠
面议Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit
面议phi29 DNA Polymerase (10 U/μL)
¥585Recombinant Ten-Eleven Translocase
¥1555Recombinant Ten-Eleven Translocase (TET)14
¥15554×Multiplex PCR Master Mix for Pathogen
¥725Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polym
¥30154× Frag/Prime Buffer
¥102伴刀豆球蛋白A磁珠
¥1255Oligo dT 磁珠
¥805文库构建专用接头试剂盒
¥515DNA文库接头专用配套试剂盒set2
¥8200产品描述
E. coli DNA ligase可以催化相邻DNA链的5’-PO4末端与3’-OH末端形成磷酸二酯键,对平末端底物DNA几乎无明显连接活性。其反应的最适pH为7.5-8.0(Tris-HCl buffer),反应需NAD作为辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比,本酶只能催化突出末端DNA之间的连接,但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下,也能连接平滑末端的DNA。另外,本款产品不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接反应。
该酶可以用于NGS甲基化建库中进行连接反应,另外也可以用于Okayama-Berg法克隆cDNA。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |||
14955ES75 | 14955ES82 | ||||
14955-A | E. coli DNA ligase (60 U/μL) | 5 μL | 20 μL | ||
14955-B | 10× E. coli DNA ligase Buffer | 30 μL | 100 μL | ||
14955-C | 10× BSA(0.05%) | 30 μL | 100 μL |
【注】:BSA应避免反复冻融,短期时间内使用可置于4℃。
单位定义
在20 μL的连接反应体系中,6 μg的 λ DNA-Hind III 在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。
运输和保存方法
干冰运输。-20℃保存,有效期1年,避免反复冻融。
注意事项
1)Buffer 在融解时,如果出现少量沉淀属正常现象,请颠倒混匀后使用。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 在无菌微量离心管中配制以下反应体系:
组分 | 体积 |
DNA | 1 μg |
10× E. coli DNA ligase Buffer | 2 μL |
E. coli DNA ligase (60 U/μL) | 1 μL |
10× BSA(0.05%) | 2 μL |
灭菌水 | Up to 20 μL |
2. 16℃温育1小时或过夜。