细胞膜绿色荧光探针(DiO)
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细胞膜绿色荧光探针(DiO)

细胞膜绿色荧光探针(DiO)

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2022-04-20 14:51:56
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属性:
供货周期:现货;规格:10mg;货号:FS-X9774;应用领域:化工;主要用途:公司产品仅用于科研;
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供货周期
现货
规格
10mg
货号
FS-X9774
应用领域
化工
主要用途
公司产品仅用于科研
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上海抚生实业有限公司

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产品简介

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细胞膜绿色荧光探针(DiO)

DiOC18(3)

10mg

1~3天

商品介绍:

本探针是常用的细胞膜荧光探针之一,呈现绿色荧光。DiO是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiO被激发后可以发出绿色的荧光,DiO和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。其中,大激发波长为484nm,大发射波长为501nm。

CAS:34215-57-1

分子式:C53H85ClN2O6

分子量:881.72

DiO可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF,溶解度约为1-2.5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。

DiO被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。DiO通常不会明显影响细胞的生存力(viability)。DiO对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于DiI,有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。

DiO除了简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

用于细胞膜荧光标记时,DiO的常用浓度为1-30μM,常用的浓度为5-10μM。DiO可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。

注意事项:荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

储存条件:4℃避光,有效期一年。
培养操作步骤:

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

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英文名称: Gold tribromide

其他英文名称: Gold(III)bromide; Auric bromide

产品规格: BR,99%

包装:1克/5克

CAS号:10294-28-7

AuBr3=436.68

级别:BR

含量:≥99.0%

性状:棕黑色粉末。对光敏感。有吸湿性。溶于水成红棕色溶液,溶于乙和甘油,但逐渐被还原成金属。熔点约160℃(分解)。有腐蚀性。

用途:生化研究。测定有机碱和某些生物碱

保存:RT,避光

实验报告:

一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

 


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