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葡萄糖氧化酶(GOD)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0690
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。 溶液的配制:
工作液的配制:取20 mL试剂一和4 mL试剂二混匀(现配现用);
试剂三:融化后可分装-20℃保存。
产品说明:
GOD(EC 1.1.3.4)广泛存在于动物和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生H2O2,是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。
GOD催化葡萄糖氧化产生H2O2,过氧化物酶在有氧存在时催化H2O2分解产生的氧又将邻联茴香胺氧化生成有色物质,颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:“具体操作步骤详见“产品资料”附件”
注意事项:
1、不同匀浆组织中GOD活力不一样,做正式试验之前请做1-2次预实验,若A2-A1>0.8,则说明组织活力太高,必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液,使A2-A1<0.8,以提高检测灵敏度。实验过程中若出现A1> A2现象请将样本用提取液稀释成适当浓度。
2、最好两个人同时做此实验,一个人比色,一个人计时,以保证实验结果的准确性。
相关发表文献:
Yan Ma,Zhe Chi,Yanfeng Li,et al. Cloning, deletion, and overexpression of a glucose oxidase gene in Aureobasidium sp. P6 for Ca2+-gluconic acid overproduction. Annals of Microbiology. October 2018;(IF1.431)
Zhao S F, Jiang H, Chi Z, et al. Genome sequencing of Aureobasidium pullulans P25 and overexpression of a glucose oxidase gene for hyper-production of Ca2+-gluconic acid[J]. Antonie Van Leeuwenhoek, 2019, 112(5): 669-678.
参考文献:
Han K, Wu Z, Lee J, et al. Activity of glucose oxidase entrapped in mesoporous gels[J]. Biochemical engineering journal, 2005, 22(2): 161-166.
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