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商品介绍:
测定意义 SP(EC2.4.1.7)主要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷键,催化葡萄糖基转移到果糖、木糖、半乳糖和鼠李糖等,合成相应的葡萄糖基低聚糖。此外,SP还能催化氢醌合成熊果苷,具有强的美白效果,在化妆品工业中具有重要应用。 测定原理 SP能够以磷酸为受体,催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸葡萄糖,在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下还原NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率,即可计算SP活性。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿和蒸馏水。 |
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 紫外分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS632125 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
胞内离子通道蛋白1(CLIC1)英文名:CLIC1 ELISA Kit粘附分子IgG样结构域蛋白1抗体包装500g
胞浆型磷脂A2(cPLA2)英文名:cPLA2 ELISA Kit尔曼综合症基因1抗体包装100mg
半乳糖凝集-3(Gal-3)英文名:Gal-3 ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族7抗体包装1g
半乳糖6硫酯(Gal-6S)英文名:Gal-6S ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族17抗体包装1g
半胱天冬蛋白(caspase-3)英文名:caspase-3 ELISA Kit含锚蛋白重复序列-因子信号抑制物盒蛋白家族12抗体包装5g
半胱蛋白抑制剂/胱抑C(Cys-C)英文名:Cys-C ELISA Kit钠ATP通道蛋白抗体包装1g
百白破抗体(DPT)英文名:DPT ELISA KitAGXT2L2蛋白抗体包装25g
白血病抑制因子受体(LIFR)英文名:LIFR ELISA Kitβ淀粉样蛋白胞内结构域相关蛋白1抗体包装5g
白血病抑制因子(LIF)英文名:LIF ELISA Kit锚蛋白重复及SAM结构域蛋白6抗体包装1g
白细胞活化黏附因子(ALCAM)英文名:ALCAM ELISA Kit二磷腺苷核糖基转移3抗体包装250mg
白三烯E4(LTE4)英文名:LTE4 ELISA Kit二磷腺苷核糖基转移5抗体包装1g
白三烯D4(LTD4)英文名:LTD4 ELISA Kit腺苷单磷脱1抗体包装5g
白三烯C4(LTC4)英文名:LTC4 ELISA Kit红蛋白Ank1抗体包装1g
白三烯B4(LTB4)英文名:LTB4 ELISA Kit腺苷琥珀裂解抗体包装100g
白介9(IL-9)英文名:IL-9 ELISA Kitα1B糖蛋白抗体包装25g
血管紧张原抗体骨成型蛋白2(BMP2)Reversine 是一种ATP-竞争性的 Aurora kinase 抑制剂,作用于 Aurora A,Aurora B 和 Aurora C,IC50 分别
蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒50管/48样土曲霉 2-溴甲基-4-甲氧基甲酯结合珠蛋白Elisa
胶孢 二氢猕猴桃内酯结核杆IgG抗体Elisa
传染性支气管炎病 3,4-二氟苯-1,2-二睫状神经营养因子Elisa
根霉属的 4-异喹啉解脲脲原体抗体Elisa
猴头 2-甲基-3-甲基-4-(3-甲氧氧基)吡啶盐酸盐解整合样金属蛋白12Elisa
色褐链霉 盐酸去甲苯福林解整合样金属蛋白33Elisa
*味牛肝 2-氟-3-基-4-吡啶解整合样金属蛋白9Elisa
香菇 4,5-二溴-1H-1,2,3-三氮唑金黄色葡萄球肠Elisa
鲁氏毛霉 1-甲巯基环基乙酸甲酯金黄色葡萄球肠AElisa
纠缠青霉 1-羟甲基环基乙金黄色葡萄球蛋白AElisa
腐皮镰孢 四氟酸亚铁(II)金葡肠Elisa
阿舒多囊霉 4-甲基-2-正基苯并咪唑-6-羧酸金属硫蛋白Elisa
淡紫紫霉 2-正基-4-甲基-6-(1-并咪唑-2-基)苯并咪唑金属肽含血小板反应蛋白1Elisa
玫红假裸囊 5-氨基-1,2,4-噻二唑盐酸盐金属肽含血小板反应蛋白5Elisa
乳酒假丝酵母 3,4-二甲基(2,3-b)-噻吩-2,5-二羧酸二乙酯紧密连接蛋白Elisa
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。