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生产厂家厂商性质
上海市所在地
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS632117 |
商品介绍:
测定意义: NADPase主要存在于植物组织中,是生物体内催化NADP+降解为NAD+的酶,与NADK一起调控NAD和NADP之间的平衡。 测定原理: NADPase能够催化NADP+水解为NAD+和无机磷的反应,通过测定无机磷的量来测定NADPase活性。 所需的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(浆)体积(ml):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照血清(浆)体积(ml):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照组织质量(g):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:按照组织质量(g):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提取:先收集细胞或细菌到离心管内,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
抗促状腺受体抗体(TRAb)英文名:TRAb ELISA Kit腺相关病5 VP1抗体包装5MG
抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)英文名:α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit脂肪脱氢抗体包装100g
抗Smith抗体(Sm)英文名:Sm ELISA Kit抗尿激1A抗体包装25g
卷曲螺旋域结合蛋白80(CCDC80)英文名:CCDC80 ELISA Kit抗尿激受体1B抗体包装5g
巨噬细胞移动因子(MIF)英文名:MIF ELISA Kit二磷腺苷核糖基化因子鸟核苷交换因子2抗体包装1g
巨噬细胞移动抑制因子(MIF)英文名:MIF ELISA Kitα增强子结合蛋白1抗体包装5g
巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)英文名:MIP-5 ELISA Kit脊髓小脑共济失调10抗体包装250mg
巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)英文名:MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit蛋白激A锚定蛋白7抗体包装1g
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)英文名:MIP-3α/CCL20 ELISA Kit腺苷三磷结合盒转运体12抗体包装5g
巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)英文名:MIP-2 ELISA Kit腺苷三磷结合盒转运体9抗体包装25g
巨噬细胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)英文名:MIP-1δ/CCL15 ELISA Kit三磷腺苷结合盒转运蛋白4抗体包装5g
巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)英文名:MIP-1β/CCL4 ELISA Kit肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体包装100g
巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)英文名:MIP1α ELISA Kit高尔基复合体相关蛋白1抗体包装25g
巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)英文名:MDC/CCL22 ELISA Kit乙酰羧化1ACCα抗体包装100mg
巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)英文名:M-CSF ELISA Kit腺核苷转运蛋白1、2、3、4抗体包装1g
磷化蛋白激B抗体促肾上腺皮质激(ACTH)L-685458是一种有效的淀粉样β蛋白前体γ分泌抑制剂, IC50为17 nM,比作用于其他天冬酰蛋白选择性高50-100倍。
NADP磷酸酶(NADPase)测试盒100管/96样小单孢 3--5-多巴D2受体Elisa
ATP 荧光仪 3-溴-4-氧代-1-羧酸叔丁酯多功能蛋白聚糖Elisa
大肠埃希 3-溴-5-苯甲多环芳烃-DNA加合物Elisa
乳酒假丝酵母 3-溴-5-氟苯甲多聚ADP核糖聚合Elisa
南海区交替红色杆 N,N-二甲基硫代氢酰基烷磺酸钠多配体蛋白聚糖4Elisa
路氏肠杆 6-硝基-2-甲多效生长因子Elisa
枯草芽孢杆 环酸叶酯多形核白弹性蛋白Elisa
融粘帚霉 4-氟-3'-二苯多药耐药相关蛋白Elisa
F56(蘑菇) 4-甲氧基邻苯二甲酸多药耐药相关蛋白1Elisa
黄薄芝 异丁酸乙基香兰酯恶性肿瘤特异性生长因子Elisa
食苯芽胞杆 2-氮杂双环[2.2.1]-5-庚烯-2-羧酸叔丁酯腭肺鼻上皮癌相关蛋白Elisa
大肠埃希 2-氨基-5-甲氧基苯甲酰儿茶 Elisa
肉色曲霉 四丁基儿茶抑Elisa
中温富盐 N-苄氧羰基乙二氧化Elisa
深褐褶 2--6-吡啶-3-二级组织趋化因子Elisa