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试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
商品介绍：
测定意义： CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中，能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应，在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用，是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。 测定原理： CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP，己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH，导致340nm光吸收值增加。 自备实验用品及仪器： 天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 |
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 微量法 |
产品规格 | 100管/96样 |
产品货号 | AS632123 |
NAD+和NADH的提取：
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（浆）体积（ml）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照血清（浆）体积（ml）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：按照组织质量（g）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：按照组织质量（g）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提取： NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。△A测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)英文名：SP-B ELISA Kit芳香基硫酯家族蛋白1抗体包装1g
肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)英文名：SP-A ELISA Kit肿瘤抑制相关蛋白PHEMX抗体包装5g
肺表面活性蛋白D(SP-D)英文名：SP-D ELISA Kit精神分裂症与犰狳重复基因抗体包装1g
肥大细胞类(MCT)英文名：MCT ELISA Kit乙脱氢1型抗体包装25g
肥大/干细胞生长因子受体(Kit/Sl/CD117)英文名：Kit/Sl/CD117 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗体包装5g
芳香(ARO)英文名：ARO ELISA Kit磷化乙酰羧化抗体包装100g
泛蛋白(Ub)英文名：Ub ELISA Kit磷化腺苷三磷结合盒转运体A1抗体包装25g
二酰基甘油(DAG/DG)英文名：DAG/DG ELISA Kit磷化铁调节蛋白1抗体包装500g
二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)英文名：DPPⅣ ELISA Kit磷化铁调节蛋白1抗体包装1g
二胺氧化(DAO)英文名：DAO ELISA Kit磷化乙酰羧化抗体包装5g
儿茶抑(CAT)英文名：CAT ELISA Kit膜粘连蛋白6抗体包装100mg
儿茶胺(CA)英文名：CA ELISA Kit锚蛋白重复结构域蛋白42抗体包装500mg
多萜长二磷寡糖蛋白环糊精糖基转移(DDOST/OST-48)英文名：DDOST/OST-48 ELISA Kit胞环蛋白肌动蛋白结合蛋白抗体包装25MG
多肽YY(PYY)英文名：PYY ELISA Kit腺病5结合蛋白BS69抗体(骨形态发生蛋白受体相关分子1)包装5MG
多巴胺D1受体(D1R)英文名：D1R ELISA Kit载脂蛋白A1抗体包装1g
衔接蛋白α-Adaptin抗体结缔组织生长因子(CTGF)3-Methyladenine (3-MA) is a selective PI3K inhibitor for Vps34 and PI3Kγ with IC
肌酸激酶(CK)测试盒100管/96样异常毕赤酵母 2,3,4,5-四氟苯甲环氧合1Elisa
酿酒酵母 2-氨基-4,6-二苯并噻唑环氧合2Elisa
尻链霉 4-(2-Boc-氨乙基)环指蛋白180Elisa
大肠埃希氏 全氟辛基季化物环指蛋白213Elisa
果生链核盘 4,7-双(噻吩-2-基)苯并[C][1,2,5]噻二唑缓激肽Elisa
膨大弯颈霉 3-溴-N,N-二缓激肽受体B2Elisa
中孢短芽孢杆 1,2,3,4-四氢-9H-吡啶并[3,4-b]脱氢Elisa
类志贺邻单胞 4--2,6-二氟氧化还原Elisa
类干酪乳杆类干酪亚种 3-氨基-4-溴吡唑氧化Elisa
绿色链霉 乙二二邻羟苯基大乙酸铁钠活化蛋白CElisa
大豆根瘤 3-甲氧基-4-活化ⅫElisa
羽扇豆根瘤 4-基-2-氟苯酸活化ⅫElisa
黄曲霉 2,2-二甲基-4-戊烯酸活化XElisa
绿色木霉 2-氨基-4,6-甲氧基-1,3,5-三活化XIIIElisa
澳型核果褐腐病 2--4-苯基烟活化XIIIElisa
