产品名称: LysoTracker Green DND-26 溶酶体绿色荧光探针

产品信息

产品描述

LysoTracker®系列探针是对活细胞中的酸性区室进行选择性染色的一类荧光染料，该类探针具有几大重要的特点，1）选择性标记酸性细胞器；2）纳摩尔级（nM）浓度即可有效标记活细胞；3）具有多色探针提供，可根据情况对样品进行多标实验。LysoTracker®结构上由一个荧光基团和相连的弱碱基构成，可自由穿过细胞膜，一般聚集在球形细胞器上，适用于观察溶酶体内部生物合成及相关发病机理。Lysotracker中性pH下仅仅发生部分质子化，因此该探针标记细胞器的原理可能与其*质子化并滞留在细胞器膜上有关。

本品LysoTracker® Green DND-26为绿色荧光标记的溶酶体探针，具有504/511nm的zui大激发/发射波长。本品以溶于无水DMSO的1mM储存液形式提供。

产品性质

CAS号（CAS NO.）	N/A
分子式（Formula）	C18H26BClF2N4O
分子量（Molecular Weight）	398.6894
Ex/Em（nm）	504/511
外观（Appearance）	黄色溶液
结构式（Structure）

运输和保存方法

室温运输。-20℃避光保存，避免反复冻融。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。*工作浓度需根据不同的实验要求、细胞类型、细胞或组织的膜通透性等进行优化。

1.工作液的配制

利用培养基或合适的缓冲液将1mM 储存液稀释至工作浓度，推荐工作液浓度为50-75nM；

【注意】：1）为了降低探针加载过度可能引起的假阳性，建议在不影响染色效果的情况下尽量使用低浓度。2）若细胞在染色后于不含染料的培养基中孵育，会观察到荧光信号的衰减和细胞的空泡化现象。

2.染色

2.1 对于贴壁细胞

1）将细胞置于培养皿中的盖玻片上，加入合适培养基，使其爬片生长。

2）待细胞生长到合适丰度，吸除培养液，加入适量37℃预热的含探针工作液。于生长状态下孵育30min～2h（具体孵育时间需根据细胞类型而定）。【注意】：对Lysotracker Green DND-26内化过程的动力学研究表明，活细胞摄取此染料仅需数秒即可。缺点在于此探针可能引起溶酶体产生“碱性效应Alkalizing effect”，也就是说过长孵育时间会诱导溶酶体pH值提高。建议仅当该探针于37℃孵育细胞1-5min才可用作pH指示剂。

3）利用新鲜培养基替换上述染色液并在荧光显微镜（含合适滤片）下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或延长染色时间。

2.2 对于悬浮细胞

1）离心，吸除上清。

2）利用37℃预热的探针工作液重悬细胞，于生长状态下孵育30min～2h（具体时间需根据细胞类型而定）。

3）离心，吸除染色液，加入新鲜培养液重悬细胞。

4）置于荧光镜下观察。若染色不够充分，建议增加染料浓度或加长染色时间。

【注意】：对于悬浮细胞，也可将细胞贴附于经BD Cell-Tak处理过的盖玻片上，然后使用类似于贴壁细胞的方法进行染色。

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