Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
Hieff NGS™ DNA分选磁珠
面议Hieff NGSTM mRNA Isolation Master Kit
面议phi29 DNA Polymerase (10 U/μL)
¥585Recombinant Ten-Eleven Translocase
¥1555Recombinant Ten-Eleven Translocase (TET)14
¥15554×Multiplex PCR Master Mix for Pathogen
¥725Hieff Canace® Uracil+ High-Fidelity DNA polym
¥30154× Frag/Prime Buffer
¥102伴刀豆球蛋白A磁珠
¥1255Oligo dT 磁珠
¥805文库构建专用接头试剂盒
¥515DNA文库接头专用配套试剂盒set2
¥8200货号 | 12214ES08 / 12214ES24 / 12214ES96 |
规格 | 8 T / 24 T / 96 T |
组分编号 | 组分名称 | 12214ES08 | 12214ES24 | 12214ES96 | |
12214-A | Endprep Buffer | 56 μL | 168 μL | 672 μL | |
12214-B | Endprep Enzyme | 24 μL | 72 μL | 288 μL | |
12214-C | Ligation Enhancer | 240 μL | 720 μL | 3×960 μL | |
12214-D | Rapid T4 DNA Ligase | 80 μL | 240 μL | 960 μL | |
12214-E | Methyl Stubby Adapter | 40 μL | 120 μL | 480 μL | |
12214-F | 2 × Canace® Uracil + PCR Mix 2.0 | 200 μL | 600 μL | 2×1200 μL |
-25~-15℃保存,有效期1年。
一、自备材料
纯化磁珠:Cat#12601,Hieff NGS® DNA Selection Beads或Cat#A63880,AMPure XP Beads或其他等效产品。
转化模块:Cat#12222,Hieff® DNA Bisulfite Conversion Kit;Cat#12223,Hieff® Mag DNA Methylation Bisulfite Kit和酶转化模块Cat#12213,Hieff® DNA Mild methyl- Conversion Kit或其他等效产品。
DNA质控:Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer或其他等效产品。
其他材料:无水乙醇、灭菌超纯水、TE Buffer (10 mM Tris-HCl,pH 8.0-8.5+1 mM EDTA)、低吸附EP管、PCR管、磁
力架、PCR仪等。
二、操作流程
图1 Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®
图2 文库片段分布示例
注:10 ng cfDNA使用Hieff NGS® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina®建库后的文库片段分布 (Agilent 2100,DNA 1000 Kit),其中红色代表酶转化方案构建的DNA文库,PCR扩增循环数为10;蓝色代表重亚硫酸盐转化方案构建的DNA文库,PCR 扩增循环数为 12。