产品属性：

中文名称：细胞膜染色试剂CM-Dil

英文名称：

产品规格：200μl

发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研

商品介绍：

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

芦荟新甙D(标准品)英文名称： Molecular sieves, 3 Å鸟嘌呤核苷结合蛋白X抗体包装5g

芦笋（标准品）英文名称： Molecular sieves, 3 ÅGRAM结构域蛋白2抗体包装1g

芦竹根（标准品）英文名称： Molecular sieves, 3 Åγ-谷酰转移轻链2抗体包装250mg

芦竹碱(标准品)英文名称： Molecular sieves, 4 Å原钙粘蛋白γA1抗体包装5g

鲁斯考皂苷元(标准品)英文名称： Molecular sieves, 4 ÅG蛋白偶联受体70抗体包装1g

鹿角（标准品）英文名称： Molecular sieves, 4 ÅG蛋白偶联受体71抗体包装5g

鹿茸（马鹿）（标准品）英文名称： Molecular sieves, 4 Å谷受体δ2/GluR-δ2抗体包装25g

鹿茸（梅花鹿（标准品）英文名称： Molecular sieves, 4 Å血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗体包装5g

鹿衔草（标准品）英文名称： Molecular sieves, 4 Å谷脱羧67抗体包装1g

路边青（标准品）英文名称： Molecular sieves, 5 Å生长抑制DNA损伤基因45抗体包装25g

路路通内酯（标准品）英文名称： Molecular sieves, 5 Å胃泌抑制肽抗体包装5g

路路通（标准品）英文名称： Molecular sieves, 5 Å葡萄糖转运蛋白4抗体包装1g

绿包藤（标准品）英文名称： Molecular sieves, 5 Å磷脂酰基蛋白聚糖-3抗体包装5g

绿茶（茶叶）（标准品）英文名称： Molecular sieves, 5 Å糖皮质激受体抗体包装1g

绿萍（标准品）英文名称： Molecular sieves, 5 Å胰高血糖样肽-1抗体包装5g

: Robinson资源名称: 问号状钩端螺旋体 质量规格：>95%前列腺E2试剂盒毛萼结; Maoecrystal A

球毛壳霉Chaetomium│globosum 质量规格：>99%,可用于培养前列腺E1试剂盒莫诺宗 ;4-Benzyloxyphe

: ATCC35106资源名称: 大肠埃希氏菌 质量规格：HPLC>98%,标准品前列腺D合成试剂盒马钱碱;Brucine
细胞膜染色试剂CM-Dil大丽花轮枝孢 3-(Boc-氨甲基)氮杂环丁烷盐酸盐性别决定区Y框蛋白1Elisa

布鲁氏病（+）阳性血清 1-[2-(trifluoromethoxy)phenyl]ethanol骨骼肌肌动蛋白α1Elisa

孟氏假单胞 D-高苯氨酸乙酯盐酸盐心肌肌钙蛋白TElisa

香菇 β-1,3-葡聚糖α横纹肌肌动蛋白Elisa

莫氏克罗诺杆 Amberlyst® A21 大孔树脂脊髓灰质炎病抗体Elisa

醋化醋杆 聚D-230乙型流感嗜血杆抗体Elisa

戴尔根霉 果聚糖脑膜炎双球抗体Elisa

红霉链霉 微球核酸 来源于金黄色葡萄球(株ATCC #27735)囊泡单转运蛋白2Elisa

酿酒酵母 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)无翅型MMTV整合位点家族成员11Elisa

土曲霉 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)多巴转运蛋白Elisa

短杆状马赛 右旋糖酐铁5-羟色受体4Elisa

香菇 醋酸丁酸纤维5-羟色受体1BElisa

巴氏醋杆 醋酸丁酸纤维眼小畸形关联转录因子Elisa

明胶样链霉 醋酸丁酸纤维精氨酸脱亚Elisa

紫丁香蘑 醋酸丁酸纤维色氨酰tRNA合成Elisa 

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)