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产品属性：
中文名称：MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒
英文名称：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit
产品规格：500次
发货周期：1～3天
商品介绍：
| MTS是一种新型甲臜化合物，和MTT同属四唑氮衍生物。MTS能被活细胞里的线粒体脱氢酶降解而产生棕黄色水溶性的甲臜，通过测定甲臜的光谱吸收，进而可以测定细胞的增殖情况。 产品特点： 1．本试剂盒是单溶液式细胞增殖与细胞毒性检测试剂，主要成分包含MTS和一个电子耦合试剂，溶液的稳定性强，反应的灵敏度高。 2．操作简便、快捷。可直接加入到检测平板。在96-孔板中检测时，无需洗涤或收获细胞，免去溶解步骤。 3．无放射性。不需要配制液闪混合物，也不需要处理废弃物。 4．与MTT相比，使用更安全。不需要使用挥发性的有机溶剂来溶解甲臜产物。 5．操作灵活，与MTT不同，平板读数后可放回温箱继续孵育，使颜色进一步生成。 储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期半年。 使用效果： 96孔板中加入细胞100μL/孔(约1×104)，37℃，5% CO2细胞培养箱培养24小时，加入适当浓度的受试化合物。培养箱中孵育适当时间，每孔中加入10μL的MTS细胞增殖及毒性检测溶液。37℃孵育1-4小时。490nm波长检测光密度。 |
细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；
⑧细胞工程.
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
ADCK1蛋白抗体
酰基合结构域蛋白4抗体
α/β水解酶4抗体
ADCK2蛋白抗体
乙醛脱氢酶16家庭A1抗体
粘附分子IgG样结构域蛋白3抗体
乙醇脱氢酶1抗体
δ氨基乙酰丙酸脱水酶抗体
肌索硬化症相关蛋白4抗体
α2巨球蛋白抗体
ACCSL蛋白抗体
甲胎蛋白抗体
β淀粉样前体蛋白结合蛋白3抗体
星形肌动蛋白抗体
系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体
磷酸化系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体
磷酸化系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体
接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体
磷酸化接头相关蛋白复合体AP-2μ链1抗体
膜粘连蛋白7抗体
3号染色体开放阅读框15抗体
载脂蛋白B受体抗体
三磷酸腺苷结合盒转运蛋白2抗体
10X Taq Buffer with KCl 4x1.25 ml
10X Reaction Buffer with MgCl2 for DNase I 1 ml
50X TAE Buffer (Tris-acetate-EDTA) 1 l
10X TBE Buffer (Tris-borate-EDTA) 1 l
10X Taq Buffer without Detergent 4x1.25 ml
10X Buffer BamHI, Lsp1109I 5x1 ml
10X Buffer BfuI 1 ml
10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase 5x1 ml
10X DreamTaq™ Buffer 4x1.25 ml
10X T4 DNA Ligase Buffer 1.5 ml
10X DreamTaq™ Green Buffer 4x1.25 ml
10X Buffer B 5x1 ml
10X Buffer G 5x1 ml
10X Buffer O 5x1 ml
10X Buffer R 5x1 ml
10X Buffer Tango™ 5x1 ml
Pyrophosphatase, Inorganic 10 units
FastAP™ Thermosensitive Alkaline Phosphatase 1000 units
FastAP™ Thermosensitive Alkaline Phosphatase 5x1000 units
FastAP™ Thermosensitive Alkaline Phosphatase 300 units
T4 Polynucleotide Kinase 500 units
T4 Polynucleotide Kinase 2500 units
T4 DNA Ligase 1000 units
T4 DNA Ligase 5x1000 units
T4 DNA Ligase, HC 5000 units
T4 DNA Ligase 200 units
MTS细胞增殖与细胞毒性检测试剂盒 DNA Ligase, LC 2x500 units
T4 RNA Ligase 1000 units
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
