商品介绍：

以下是细胞生物学试剂的详细介绍：

操作步骤：

1. 样品染色

1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。

2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。

对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。

3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。

4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。

2. 样品检测

1) 流式细胞仪检测：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。

建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。

2) 荧光显微镜检测：

染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

新穿心莲内酯（标准品）英文名称： Tenacissoside H粘附分子3抗体（脊髓灰质炎病受体相关蛋白3）包装5g

新地奥斯明英文名称： Cucurbitacin E螺旋环螺旋蛋白2抗体包装1g

新绿原(标准品)英文名称： Koumine胚胎发育相关蛋白Nodal抗体包装5g

新芒果苷(标准品)英文名称： Gelsemine增殖相关蛋白NANOS1抗体包装1g

新藤黄(标准品)英文名称： Procyanidin B1同源盒蛋白NOBOX抗体包装5g

新乌头原碱（标准品）英文名称： Cyasterone转录因子NAC1抗体包装100g

杏叶防风（标准品）英文名称： Tetrahydroberberine,THB神经生长因子受体抗体包装25g

雄蚕蛾（家蚕）（标准品）英文名称： Tenacissoside I磷化KB抑制蛋白激ε包装500g

熊胆粉（标准品）英文名称： Tenacissoside G磷化神经纤毛蛋白1抗体包装1g

熊果苷（标准品）英文名称： Praeruptorin C1型神经纤维瘤抗体包装250mg

熊果；乌苏(标准品)英文名称： Pterostilbene磷化1型神经纤维瘤抗体包装5g

绣线菊（标准品）英文名称： Pterostilbene中心粒蛋白Nudel抗体包装100g

溴东莨菪碱（标准品）英文名称： Rotenone磷化中心粒蛋白Nudel抗体包装25g

徐长卿（标准品）英文名称： 7-Epitaxol类固脱氢样蛋白NSDHL抗体包装25g

续断（川续断）（标准品）英文名称： Solasodine磷化核因子p50/k基因结合核因子抗体包装5g

荧光假单胞菌Pseudomonas│fluorescens 质量规格：>97%,BR解整合样金属蛋白33试剂盒川芎;Tetramethylpyraz

裂孔平伏菌Poria│versipora (Pers.) Romell 质量规格：>99%解整合样金属蛋白19试剂盒茶多酚;Tea polyphenol

酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：HPLC>99%,标准品解整合样金属蛋白15试剂盒茶;L-Theanine
Weil髓鞘染色液稻麦穗孢霉 草酸锌糖化血红蛋白A1cElisa

无花果曲霉 L-2-溴苯氨酸糖化血清蛋白Elisa

芹侧耳（杏鲍菇） 1-(3-氟-4-基)乙酮糖皮质Elisa

传染性法氏囊病病 3--4--1-磺酰糖皮质类固受体Elisa

金太阳杏叶细性穿孔病 4--3-甲糖原合成Elisa

青灰红菇 N-4-苯甘氨酸糖原合成激Elisa

金黄壳囊孢 3-甲基吗啉糖原磷酸化Elisa

大肠埃希氏 3-肼基吡啶天门冬氨酸Elisa

木糖葡萄球 5-氨基-2-甲酯谷草转氨;天门冬氨酸氨基转移Elisa

木霉 2-吗啉基铁蛋白Elisa

构巢曲霉 4-叔丁基苄铁调Elisa

孢小克银汉霉轮生变种 2-甲酸甲酯同型半胱氨酸Elisa

坟墓节杆 4-氧代酮盐酸盐铜锌超氧化物歧化1Elisa

赖氨酸芽孢杆 5-硝基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐酮体Elisa

三叶草根瘤 4-(9H-咔唑-9-基)苯酸透明带结合蛋白3Elisa