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以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Caspase 1 Activity Assay Kit | 20次|100次 | 1~3天 |
商品介绍:
本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 1酶活性或纯化的caspase 1酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。 试剂盒组分: 裂解液——————8ml 检测缓冲液——————8ml Ac-YVAD-pNA(2mM)———200μl pNA(10mM)——————200μl Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 1也称interkeukin 1b conberting enzyme(ICE),有时被写作caspase-1或caspase 1,是caspase家族中可以剪切IL-1b前体蛋白或IL-18前体产生相应成熟的细胞因子的caspase。Caspase 11可以剪切45kD的caspase 1前体蛋白,产生20kD和10kD的片段,这两个片段可以形成异源二聚体(heterodimer),并进一步由两个异源二聚体形成四聚体。Caspase 1可以通过剪切其凋亡Bcl-XL来调节细胞凋亡,并通过其对一些细胞因子前体的剪切来调控相关免疫反应。 本caspase 1活性检测试剂盒是基于caspase 1可以催化底物Ac-YVAD-pNA(acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 1的活性。pNA在405nm附近有强吸收。 试剂盒中提供了caspase 1催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 1酶活性的标准品。 储存条件:-20℃。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
同型半胱(Hcy)英文名称:Hcy ELISA Kit磷化腺苷单磷活化蛋白激α1抗体包装1g
铁调(Hepc)英文名称:Hepc ELISA Kit双调蛋白(结肠直肠源性生长因子)抗体包装250mg
铁蛋白(Ferritin)英文名称:Ferritin ELISA Kit磷化通道蛋白2抗体包装100g
铁蛋白(FE)英文名称:FE ELISA Kit粘附相关激抗体包装25g
天门冬基转移(AST)英文名称:AST ELISA Kit磷化粘附相关激抗体包装5g
天冬基转移(AST)英文名称:AST ELISA Kit磷化蛋白激B抗体包装1g
糖原磷化同工MM(GP-MM)英文名称:GP-MM ELISA Kit磷化通道蛋白2抗体包装5g
糖原磷化同工II(GP-II)英文名称:GP-II ELISA Kit磷化APP淀粉样肽前体蛋白抗体包装1g
糖原磷化同工BB(GP-BB)英文名称:GP-BB ELISA Kit磷化蛋白激B抗体包装1g
糖原合成激(GSK)英文名称:GSK ELISA Kit磷化APP淀粉样肽前体蛋白抗体包装5g
糖缺失性转铁蛋白(CDT)英文名称:CDT ELISA Kit磷化活化转录因子4抗体包装1g
糖皮质类固受体(GR)英文名称:GR ELISA Kit磷化雄激受体抗体包装5g
糖皮质激受体β(GR-β)英文名称:GR-β ELISA Kit磷化雄激受体抗体包装5mg
糖皮质激受体α(GR-α)英文名称:GR-α ELISA Kit磷化蛋白激AKT1,2,3抗体包装1g
糖类抗原199(CA199)英文名称:CA199 ELISA Kit磷化蛋白激B抗体包装1g
ANGEL1蛋白抗体胎蛋白(αFP)Ponatinib是一种有效的,可口服的多靶点激抑制剂,抑制Abl,PDGFRα,VEGFR2,FGFR1 和 Src 的 IC50 分别为0.37 nM,
Caspase 1 活性检测试剂盒金龟子绿僵 四苯基氯化鏻α;β干扰素受体检测试剂盒
牛型放线 2-氨基-4-氯代苯并噻唑α1抗胰蛋白酶检测试剂盒
假桄榔叶点霉 3-氨基-3-(4-)酸α1酸性糖蛋白检测试剂盒
厚壁芽孢杆 2-氟苯酸α1-微球蛋白检测试剂盒
苏云金芽胞杆蜡螟亚种 4,4'-(2-甲基-6-乙基苯)α2-HS糖蛋白检测试剂盒
哈茨木霉 磺二甲基嘧啶钠盐α2巨球蛋白检测试剂盒
酿酒酵母 1-溴-2-乙基苯α2抗纤溶酶检测试剂盒
豌豆根瘤 2,4-二氯αL岩藻糖苷酶检测试剂盒
斑玉蕈 2-溴苯基乙α-N-乙酰-半乳糖氨酶检测试剂盒
地霉半乳糖酵母 苄磺酰氯α-氨基羟甲基恶唑酸检测试剂盒
粘着剑 1-溴-2,6-二氯苯α淀粉酶检测试剂盒
Acinetobacter genospecies 2-氟-3-甲基-5-硝基吡啶α-防御素检测试剂盒
胶孢 三(三溴新戊基)磷酸酯α-辅肌动蛋白4检测试剂盒
红球 D-(+)-二对甲氧基苯甲酰α甘露糖苷酶检测试剂盒
松针散斑壳 2-氯-5-α干扰素检测试剂盒