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以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
10ml|50ml | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
用途: 通过碘-碘化钾(I-KI)染色,检测花粉活力 注意事项: 根据淀粉遇碘变蓝的特性,从蓝色的深浅程度来判断花粉粒中淀粉的含量,进而确定花粉活性的高低。 储存条件:RT,避光,12个月 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
酿酒酵母腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体Human EFCAB14(EF-hand calcium-binding domain-containing protein 14) ELISA Kit小鼠羟甲基戊二单酰(HMG-CoA)免疫试剂盒
大肠埃希菌去整合样金属蛋白19抗体Human KDM2A ELISA Kit小鼠羟脯(Hyp)免疫试剂盒
红色红曲霉原癌基因AF4蛋白抗体Human KCNJ5 ELISA Kit小鼠前心钠肽(Pro-ANP)免疫试剂盒
黑曲霉整合样金属蛋白与凝血样1蛋白抗体Human KCNJ15 ELISA Kit小鼠前列腺特异性抗原(PSA)免疫试剂盒
贝莱斯芽胞杆菌整合样金属蛋白与凝血样2蛋白抗体Human KCNJ3 ELISA Kit小鼠前列腺性磷(PAP)免疫试剂盒
新疆溶杆菌整合样金属蛋白与凝血样3蛋白抗体Human KCNJ1 ELISA Kit小鼠前列腺G/H合1(PTGS1)免疫试剂盒
黑木耳去整合样金属蛋白20抗体Human KCNK18 ELISA Kit小鼠前列腺F(PGF)免疫试剂盒
拟青霉去整合样金属蛋白23抗体Human KCNN3 ELISA Kit小鼠前列腺E2合成(PGES)免疫试剂盒
坚强芽孢杆菌去整合样金属蛋白28抗体Human KCNK5 ELISA Kit小鼠前列腺E2(PGE2)免疫试剂盒
皱环球盖菇去整合样金属蛋白32抗体Human KCNN4 ELISA Kit小鼠前列腺E1(PGE1)
米兰链霉菌整合样金属蛋白与凝血样4蛋白抗体Human KCNN1 ELISA Kit小鼠前列腺D2(PGD2)免疫试剂盒
规则东方喜盐菌膜粘连蛋白9抗体Human KCNV1 ELISA Kit小鼠前列环(PGI2)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌整合样金属蛋白与凝血15型抗体Human KCNQ1DN ELISA Kit小鼠前白蛋白(PA)免疫试剂盒
白酒 铅 整合样金属蛋白与凝血2型抗体Human KCNH7 ELISA Kit小鼠葡萄糖依赖性胰岛释放多肽(GIP)免疫试剂盒
酿酒酵母整合样金属蛋白与凝血8型抗体Human KCTD12 ELISA Kit小鼠葡萄糖激(GCK)免疫试剂盒
玫瑰淡紫链霉菌整合样金属蛋白与凝血9型抗体Human KCNS2 ELISA Kit小鼠葡萄糖调节蛋白78(GRP78)免疫试剂盒
独岛栖海杆菌Maribacter│dokdonensis 质量规格:>99%,BR白介2可溶性受体α链试剂盒香兰
拟诺卡氏菌Nocardiopsis│sp. 质量规格:>99%,BR白介29试剂盒消旋山莨菪碱
葡萄座腔菌Botryosphaeria│dothidea (Moug.) Ces. & De Not. 质量规格:>98%,BR白介28B试剂盒卫矛
花粉活力染色液(I-KI法)林生蜡蘑 1-乙基-3-氟苯可溶性血管内皮生长因子受体Elisa
具核梭杆聚核亚种 4-丁醋酸酯雌受体相关受体αElisa
毛木耳(台耳) 6-甲基烟酰脱2Elisa
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枯草芽孢杆 2-溴-4-尼克酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化1Elisa
粪肠球 3-羰基-环丁烷甲酸甲酯肌苷酸Elisa
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类诺卡氏属 4-氨基-5-甲氧基嘧啶乳酸脱氢Elisa
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马赛 环甲酰肼饱和磷脂酰Elisa
头花革 2-(硫代甲基)乙盐酸盐卵磷脂Elisa
枯草芽胞杆 顺式-六氢异盐酸盐胶原IElisa
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