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以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
250ml×3 | 1~3天 |
商品介绍:
瑞氏染液主要应用于血液和骨髓涂片染色。 操作步骤 1. (选做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室温固定15-30 分钟。 2. 吸去固定液,室温通风晾干。 3. 将试剂一滴加到载玻片上,均匀覆盖住载片上血细胞,染色时间约为1 分钟。等染液有变红的趋势时,迅速滴加两倍试剂一的量的试剂二。继续染色5 到8 分钟。 4. 小股水流洗片,防止将大量的细胞从载片上冲落下来从而影响以后的观察。30s 水洗结束后将载片放到阴凉处风干。 5. 显微镜镜检。 染色结果 1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。 2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆中各种颗粒区分明显。其中中性粒细胞浆中颗粒呈淡紫红色,嗜酸粒细胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。 注意事项 1. 推片:取全血3 微升左右置载玻片上,将推玻片保持与载玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移与血滴接触,即可见血液沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面向前滑动,至血液铺完血膜为止。 2. 涂片时不要太厚也不要太薄,太厚红细胞重叠并易皱,太薄时不易找到白细胞。 3. 用蜡笔在血膜两头划线,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否则染色时血膜易脱落。 4. 试剂一及二染液不能过少,以防很快蒸发引起染液沉淀。试剂一不可少于400 微升,试剂二是试剂一的1 倍量。滴加试剂一及二时要轻摇玻片或用洗耳球对准血片吹气,使染液充分混合。 5. 镜检时如果红细胞偏蓝,请放在蒸馏水中1-3 分钟,直至红润为止。 6. 染色过淡,可复染。染色过深,可用水冲洗或浸泡,还可用75%乙醇脱色3-5 秒。 储存:2~8℃,避光,有效期12个月。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
伊维菌(标准品)英文名称: Aucubin微管相关蛋白EB家族3抗体包装25g
依达拉奉(标准品)英文名称: Metronidazole真核翻译起始因子5抗体包装5g
依法韦仑(标准品)英文名称: Metronidazole遗传性前列腺癌蛋白2抗体包装25g
依那普利拉(标准品)英文名称: 8-O-Acetylharpagide磷化丝裂原活化蛋白激1抗体包装5g
依那普利双(标准品)英文名称: Chrysoobtusin磷化丝裂原活化蛋白激1抗体包装25ml
依诺肝钠(标准品)英文名称: Myristicin磷化丝裂原活化蛋白激1抗体包装5ml
依诺沙星(标准品)英文名称: Kakuol染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体包装100mg
依帕司他(标准品)英文名称: L-Asarinin上皮微管相关蛋白7抗体包装1g
依普利(标准品)英文名称: Gitogenin碱性鞘磷脂7抗体包装100g
依替膦二钠(标准品)英文名称: Isoliquiritigenin表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体包装25g
依替米星(标准品)英文名称: Isoliquiritigenin长链脂肪延长长ELOVL6抗体包装100g
*度(标准品)英文名称: Ginsenoside Re酪蛋白激受体A6抗体包装25g
*度(标准品)英文名称: Ginsenoside F4酪蛋白激受体A3抗体包装5g
*红霉(标准品)英文名称: Ginsenoside RK3酪蛋白激受体A7抗体包装1g
*(标准品)英文名称: Ginsenoside RH4酪蛋白激受体B1抗体包装5g
腐皮镰孢Fusarium│solani 质量规格:>95%,BR糖缺失性转铁蛋白试剂盒2,3,5,4’-四羟基二乙烯-2-O
: ATCC27562=DSM10143=NBRC15645=JCM3725=BCRC12905=CCRC12905=CECT529=CCUG13448资源名称: 创伤弧菌 质量规格:HPLC>95%,标准品糖皮质激受体β试剂盒石吊兰;Lysionotin
短芽孢杆菌Bacillus│pumilus 质量规格:>900μg//mg,USP,BR糖皮质激受体α试剂盒射干苷元;tectorigenin
快速瑞氏染液泡盛曲霉 反-2-己烯酸乙酯3氧-5β-类固脱氢Elisa
恶臭假单胞 2-羟基-3-吡羧酸甲酯3α羟基类固3-脱氢Elisa
条纹白蚁伞 3,6-二氯哒-4-3α羟基类固脱氢Elisa
伞枝犁头霉 4-溴-1H-吡咯-2-羧酸20α羟基类固脱氢Elisa
米曲霉 [3-(二甲基氨基)基]三苯基磷溴化物氢盐类固21单加氧Elisa
炭黑曲霉 3-氨基-2-甲氧基吡啶-5-酸频哪酯耳椎蛋白90Elisa
Actinomadura cellulosilytica 2-(2-吡啶基)异硫脲-N-氧化物盐酸盐trip13Elisa
大肠埃希氏 烯异噻唑P450胆固侧链裂解Elisa
河生肠杆 5(6)-氨基荧光内啡肽Elisa
网孢正青霉 氯羰基亚磺酰氯CORINElisa
白假丝酵母 1,2,4,5-环己烷四甲酸二酐髓样分化因子88Elisa
冷温木拉克酵母 5-乙基-4-羟基-2-甲基-3(2H)-呋喃酮甘油-3-磷酸脱氢抗体Elisa
卡莫纳枝芽孢杆 L-环己基氨酸新型隐球抗体Elisa
黑曲霉 咪唑并[1,2-a]嘧啶基质金属蛋白1Elisa
地霉 反-4-氨基环己抗反应蛋白7A域抗体Elisa