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产品属性:
中文名称:抗酒石酸酸性磷酸酶染液
英文名称:
产品规格:20T
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
商品介绍:
检验原理: 在酸性的缓冲液中,细胞内酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联,生成不溶性的偶氮染料沉淀,当底物中存在酒石酸时,该反应只出现在特异性细胞中。 用途: 抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色可以了解破骨细胞的功能状态,并对毛细胞性白血病有助诊断,本染液可用于石蜡切片、血液、骨髓及培养细胞的涂片、爬片、以及冰冻切片的细胞染色。 储存:4℃,有效期6个月。 |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
盐伊托必利(标准品)英文名称: Oleanolic acid电子转移黄蛋白脱氢抗体包装25g
盐依匹斯汀(标准品)英文名称: Oleanolic acidEGF受体7跨膜结构域蛋白1抗体包装5g
盐乙丁(标准品)英文名称: Oleanolic acid乙激2抗体包装25g
盐乙哌立松(标准品)英文名称: Shikimic acid磷化Ets转录因子家族ets1抗体包装5g
盐异(标准品)英文名称: Shikimic acid磷化上皮癌转化蛋白2抗体包装100g
盐异肾上腺(标准品)英文名称: Riociguat嗜性粒过氧化物抗体包装10g
盐左西替利(标准品)英文名称: Pheniramine Maleate核内切G抗体包装25g
盐左旋咪唑(标准品)英文名称: FTase Substrate, Fluorogenic酪蛋白激受体A10抗体包装500g
盐左氧沙星(标准品)英文名称: Linaclotide 胞吐囊复合体蛋白2抗体包装100ml
氧沙星(标准品)英文名称: benzoylpaeoniflorin 磷化4E结合蛋白1抗体包装25ml
氧(标准品)英文名称: 3,4,5-Tricaffeoylquinic acid磷化丝裂原活化蛋白激1/2抗体包装1g
叶(标准品)英文名称: Alisol A 24-acetate泛交联抗体包装250mg
伊潘立(标准品)英文名称: Alisol C monoacetate EB病核抗原-3B抗体包装100g
伊曲康唑(标准品)英文名称: Sclareolide磷化驱动蛋白样蛋白1抗体包装25g
伊索拉定(标准品)英文名称: Sclareolide乙酰基转移EID1抗体包装5g
: IFFI06005资源名称: 嗜乳杆菌 质量规格:potency>980ug/mg,BR糖原合成激3试剂盒桑皮苷A;mulberroside A
土地戈登氏菌Gordonia│terrae 质量规格:HPLC>98%,标准品糖原合成激试剂盒麝香;3-Methylcyclopen
果生链核盘菌Monilinia│fructigena Honey 质量规格:94.0-105.0%,USP,BR糖原合成天然;Borneol
抗酒石酸酸性磷酸酶染液球形芽孢杆 叶绿铜钠盐戊型肝炎病抗原Elisa
地中海拟无枝酸 沙美特罗类白抗原B27Elisa
热带假丝酵母 苯基-β-D-吡喃半乳糖苷补体因子PElisa
出芽短梗霉 5-氨基异酞酸单甲酯丝氨酸肽抑制因子Kazal型4Elisa
空肠弯曲杆 苄基苯基碳酸酯色P4503A4Elisa
佛雷德里克斯堡假单胞 2-氨基-6-溴乙型脑炎病IgG抗体Elisa
Aurantimonas coralicida 2,6,7-三氯-3-三氟甲基喹喔啉维甲酸诱导基因1蛋白Elisa
疏水戈登氏 N-异基-4甲酸类固硫酸酯Elisa
荧光假单胞 9-双环[3.3.1]壬烷磺基转移Elisa
济州单胞 邻苄基苯3β羟基5类固脱氢Elisa
黑根霉 9-溴-1-壬烯胆固7α羟化Elisa
谷氨酸棒杆 2-溴-6-羟基吡啶类固17α单加氧Elisa
蜡状芽孢杆 4-(2,2,2-三氟乙氧基)类固异构Elisa
油菜核病 4-氨基-2-氯-3-硝基吡啶皮质类固11β脱氢同工1Elisa
施氏假单胞 L-乳酸锂皮质类固11β脱氢同工2Elisa
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)