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以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
PND-1186 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介绍:
英文名称:PND-1186 产品规格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg PND-1186可逆地抑制FAK活性,IC50为1.5nM。 注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途! CAS号:1061353-68-1 别名:SR-2516;VS-4718 纯度:99.71% 分子量:501.5 结构式: PND-1186结构式 储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
葡枝根霉衔接蛋白γ/γ1-Adaptin抗体Human WDR92 ELISA Kit鸡H5型病(H5N1)抗体(IgG)免疫试剂盒
迪吉氏黄杆菌半乳糖瓦尔登转化抗体Human WIT1 ELISA Kit鸡G0/G1期开关基因(G0S2)免疫试剂盒
斜卧青霉半乳糖凝集10抗体Human WNK4 ELISA Kit鸡FAM172A蛋白(FAM172A)免疫试剂盒
大肠杆菌半乳糖激2抗体Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit鸡C反应蛋白(CRP)免疫试剂盒
红色红曲半乳糖脱氢抗体Human WRAP53 ELISA Kit鸡CD8分子(CD8)免疫试剂盒
Erwinia aphidicola 硫软骨裂解抗体Human WRN ELISA Kit鸡CD4分子(CD4)免疫试剂盒
燕麦状曲霉多肽N-乙酰基半乳糖转移10抗体Human WDR81 ELISA Kit鸡CD3分子(CD3)免疫试剂盒
间胞囊菌多肽N-乙酰基半乳糖转移11抗体Human WSB1 ELISA Kit鸡B因子(BF)免疫试剂盒
白蘑菇多肽N-乙酰基半乳糖转移12抗体Human WDR92 ELISA Kit鸡5羟色/血清/血清(5HT/ST)免疫试剂盒
白地霉多肽N-乙酰基半乳糖转移1抗体Human WRNIP1 ELISA Kit鸡5核苷(5-NT)免疫试剂盒
冬菇晶状体球蛋白γ3/γC-crystallin/白内障相关蛋白抗体Human WDR46 ELISA Kit鸡Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)免疫试剂盒
白色盐多孢菌γ-微管蛋白复合物GCP3抗体Human WEE2 ELISA Kit鸡Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)免疫试剂盒
紫色团胞链霉菌胍基乙N甲基转移抗体Human WDR5 ELISA Kit鸡17-类固(17-KS)免疫试剂盒
运动节杆菌α-葡萄糖苷C抗体Human WDR55 ELISA Kit鸡17羟皮质类固(17-OHCS)免疫试剂盒
粘孢白僵菌生长激释放因子受体抗体Human WDR6 ELISA Kit鸡13,14二氢15-前列腺F2α(PGFM)免疫试剂盒
酿酒酵母3-磷甘油脱氢抗体Human WDR18 ELISA Kit鸡1,4,5-三磷肌(IP3)免疫试剂盒
小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格:standard for GC,≥98.0%(GC)四氢小檗碱
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 质量规格:分析标准品,≥99.0%(GC)棉酚
彩色豆马勃Pisolithus│tinctorius (Pers.) Coker & Couch 质量规格:Standard for GC,>99.5%(GC)鞣花
FAK抑制剂(PND-1186)鲍姆木层孔 3-羟基磺酸(含有数量不等的3,3'-氧基二烷磺酸)(约的水溶液,约7.8mol/L)一磷酸腺苷Elisa
根霉 6-苄氧基L苯氨酸解氨Elisa
假单胞属 N-Boc-D-色氨瘤病16型L1Elisa
瓦尼针层孔 2,3-二苯基哌三叶因子Elisa
冷温木拉克酵母 硝酸镨(III)六水合物巴氏杆Elisa
放射形根瘤 (S)-哌-2-羧酸超氧化物歧化Elisa
芬尼青霉 2,5-二溴-3-硝基吡啶过氧化氢Elisa
棒曲霉 5-溴-2-羟基-3-硝基吡啶敏感性脂肪Elisa
雅致放射毛霉 3-溴-5-硝基吡啶神经氨酸Elisa
大豆慢生根瘤 6-基磷脂A1Elisa
枝孢霉 2--6-甲氧基吡啶-4-羧酸磷脂A2Elisa
贪噬属 1-Boc-4-溴甲基磷脂CElisa
卷枝毛霉 2,2-二氟-1,3-苯并二恶茂脂肪甘油三酯脂Elisa
黄色短杆* 3-四甲二酰甘油磷酸转移Elisa
解淀粉芽孢杆 4-氨基-3--5-甲溶血卵磷脂酰基转移Elisa