产品属性：

中文名称：线粒体超氧化物染色试剂盒-M13

英文名称：

产品规格：30T|50T

发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研

商品介绍：

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

节裂角茴香（标准品）英文名称： Amberlyst 15 ion-exchange resinG基丁受体γ1/GABAA Rγ1抗体包装1g

结石草（标准品）英文名称： Amberlite® IRA-900磷化γ基丁γ2受体抗体包装250mg

介芬英文名称： Amberlite® XAD16G基丁受体γ3/GABAA Rγ3抗体包装5g

芥子（标准品）英文名称： AramiteG基丁受体ε/GABAA Rε抗体包装100ml

芥子碱英文名称： Aramite solutionγ-基丁受体相关蛋白抗体包装25ml

芥子碱硫盐（标准品）英文名称： Aramite solutionG基丁A型受体θ/GABAA Rθ抗体包装1g

金合欢;槐（标准品）英文名称： AnilofosG基丁A型受体rho1 /GABAA Rρ1抗体包装5g

金莲花（标准品）英文名称： Amberlite® IRA-410 ion-exchange resinG基丁A型受体rho2 /GABAA Rρ2抗体包装25g

金毛耳草(黄毛耳草）（标准品）英文名称： Ammonium phosphate monobasicG基丁B型受体结合蛋白抗体包装5g

金钱草（标准品）英文名称： Ammonium phosphate monobasic谷受体δ1/GluR-δ1抗体包装10g

金荞麦（标准品）英文名称： Amberlite® XAD7HP谷受体相关蛋白1抗体包装2.5g

金雀花碱,野靛碱（标准品）英文名称： Amberlite XAD4环磷鸟苷门控通道蛋白CNG4抗体包装1g

金石蚕苷（标准品）英文名称： trans-Anethole甘受体α1+甘受体α2抗体包装25g

金丝桃苷(标准品)英文名称： Behenic acid甘受体α3/GlyR α3抗体包装5g

金丝桃(标准品)英文名称： tert-Butyl ethyl etherG蛋白偶联受体C5家族亚型D抗体包装1g

藤黄微球菌Micrococcus│luteus 质量规格：进分sigma M6545去唾液糖蛋白受体试剂盒鸟苷;Guanosine

铜绿假单胞菌Pseudomonas│aeruginosa 质量规格：>98%,USP,可用于培养去肾上腺试剂盒尿;Urea

三色青霉Penicillium│tricolor 质量规格：HPLC>98%,标准品趋化因子受体3试剂盒尼奥林;Neoline，Bullatin
线粒体超氧化物染色试剂盒-M13长枝木霉 10058-F4ATP合亚基OElisa

枯草芽孢杆 5-氟-2-甲基糜蛋白Elisa

毛栓孔 科里内酯组蛋白Elisa

蓝微褐链霉 Phe-Ala乳酸脱氢BElisa

紫红链霉 1-(4-)哌盐酸盐雷帕霉靶蛋白C1Elisa

节杆 环己烷丁酸铝二乙酰基转移Elisa

猴头 2,3',6-三氯联苯精脒;精N1-乙酰基转移1Elisa

尖顶盐单胞 甲中喷布特罗溶液标准物质精脒;精N1-乙酰基转移1Elisa

嗜果黑星 2-氯-1,3-二氟苯乙型脑炎病Elisa

粪肠球 腺苷2′:3′-循环磷酸钠盐原纤维蛋白-1Elisa

努比卤地无氧芽孢杆 [3-(trifluoromethyl)phenyl]hydrazine肉碱棕榈酰基转移1αElisa

草酸青霉 1-氯-3-甲氧基烷β淀粉样蛋白25-35Elisa

卡伍尔链霉 7-甲氧基-3,7-二甲基辛肾上腺能受体β激1Elisa

拟胞囊 异辛烷中PCB138溶液白介30Elisa

多主葡萄壳 7-甲氧基-1-茚酮肌纤蛋白Elisa 

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)