产品属性：

中文名称：PluronicF-127

英文名称：

产品规格：1g

发货周期：1～3天
公司产品仅用于科研

商品介绍：

细胞生物学研究有以下几个方面：

细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：

①细胞核、染色体以及基因表达的研究；

②生物膜与细胞器的研究；

③细胞骨架体系的研究；

④细胞增殖及其调控；

⑤细胞分化及其调控；

⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；

⑦细胞的起源与进化；

⑧细胞工程.

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；

二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

盐替罗非班（标准品）英文名称： D-(−)-Salicin转录因子ERF抗体包装1g

盐替扎尼定（标准品）英文名称： D-(−)-Salicin磷化转录因子ERF抗体包装5g

盐头孢吡肟 (标准品)英文名称： Magnolol真核肽链释放因子1抗体包装10MG

盐头孢噻呋(标准品)英文名称： Magnolol真核肽链释放因子3a抗体包装1g

盐头孢他美酯(标准品)英文名称： Esomeprazole magnesium trihydrate表皮生长因子受体底物15抗体包装5g

盐土霉(标准品)英文名称： Rutin内吞作用辅助蛋白EPN1抗体包装10MG

盐托烷司琼（标准品）英文名称： Rutin内吞作用辅助蛋白EPN2抗体包装100g

盐妥拉唑林（标准品）英文名称： Neosperidin dihydrochalcone内质网定位蛋白ERGI3抗体包装25g

盐妥洛特罗（标准品）英文名称： Neosperidin dihydrochalcone内质网氧化物蛋白Ero1-Lα抗体包装5g

盐万古霉(标准品)英文名称： Oxymatrine内质网蛋白ERp19抗体包装25g

盐维拉帕米（标准品）英文名称： Oxymatrine内质网蛋白ERp72抗体包装5g

盐（标准品）英文名称： Andrographolide结核分枝杆菌分泌性蛋白ESAT6抗体包装100g

盐戊乙奎（标准品）英文名称： Andrographolide真核翻译起始因子1抗体包装25g

盐西替利（标准品）英文名称： Apigenin上皮粘连调控蛋白ESRP2抗体包装500g

盐溴己新（标准品）英文名称： ApigeninT和嗜性粒表达特应性皮炎蛋白ETEA抗体包装1g

枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格：含量测定糖原磷化同工II试剂盒;Strychnine

菲罗茄毕赤氏酵母Pichia│philogaea 质量规格：>855ug/MG,USP30糖原磷化同工BB试剂盒山姜;Alpinetin

平滑假丝酵母Candida│parapsilosis 质量规格：效价测定糖原磷化试剂盒D-松;D-Pinitol
PluronicF-127假单胞 5-甲基水杨酸抗单链DNA抗体;变性DNA抗体Elisa

小孢矛束霉 4-吗啉乙酸盐酸盐磷脂酰肌抗体IgGElisa

米曲霉 1-甲基吡唑-3-磺酰氯磷脂酰肌抗体IgMElisa

霍氏肠杆 1,4-二-2-（易）瘤病16型E6蛋白抗体Elisa

堀越氏芽孢杆 乙酸薄荷酯瘤病16型E7蛋白抗体Elisa

白色念珠 4-氨基-N-甲酰共济失调蛋白Elisa

Marisediminicola 氨酸苄酯扩张性共济失调突变基因Elisa

山茶 扎托布洛芬5核苷酸Elisa

黑曲霉 外-3,6-环氧-1,2,3,6-四氢邻苯二甲酸酐核受体辅阻遏物2Elisa

岸海杆状 2-羟基苯基酸αL岩藻糖苷Elisa

葡萄座腔属 2-溴苯酸乙酯弗里德赖希共济失调蛋白Elisa

糙孢篮状 [1,3-二(2,4,6-苯基)-2-亚咪唑烷基]二氯-(3-苯基-1H-茚-1-亚基)(三环己抗BP180-IgE抗体Elisa

绿色木霉=木木霉 5-氯-2,3-二氟吡啶抗BP230-IgE抗体Elisa

坚强芽孢杆 4,6-二甲氧基-2-(苯氧基羰基)氨基嘧啶甘露糖Elisa

扣囊复膜孢酵母 (S)-3-氨基-3-(4-)酸甲酯血小板膜糖蛋白ⅡbElisa 

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。

8、结果分析

a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)